产品属性
产品名称 | 颗粒酶B抗体 | 货号 | YS-K7064 |
英文名称 | Granzyme B Rabbit pAb | 用途 | 仅供科研实验 |
商品介绍
产品应用:
Not yet tested in other applications.
Optimal working dilutions must be determined by the end user.
英文别名:GranzymeB; Granzyme-B; C11; Cathepsin G-like 1; CTLA-1; Cathespin G Like 1; CCPI; CCP-1; CGL 1; CGL1; CSP B; CSPB; CTLA 1; CTLA1; CTSGL 1; CTSGL1; Cytotoxic serine protease B; Cytotoxic T Lymphocyte Associated Serine Esterase 1; Cytotoxic T lymphocyte proteinase 2; Fragmentin 2; Fragmentin2; Granzyme 2; Granzyme2; GRB; GZMB; Cytotoxic T-lymphocyte proteinase 2; Fragmentin-2; GRAB_HUMAN; Granzyme B(granzyme 2, cytotoxic T lymphocyte associated serine esterase 1); Granzyme B; Granzyme-2; GranzymeB; HLP; T cell serine protease 1 3E; T cell serine protease 1-3E; T-cell serine protease 1-3E; HLP; Human lymphocyte protein; Lymphocyte protease; Protease Serine B; SECT; AA 18-29; T cell serine protease 1.
交叉反应:Human
抗体来源:Rabbit
免疫原:KLH conjugated synthetic peptide derived from human GZMB
亚型:IgG
性状:Liquid
纯化方法:affinity purified by Protein A
克隆类型:Polyclonal
理论分子量：25 kDa
浓度：1mg/ml
储存液：0.01M TBS (pH7.4) with 1% BSA, 0.02% Proclin300 and 50% Glycerol.
保存条件：Shipped at 4℃. Store at -20℃ for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles.
注意事项：This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.
原理特点
颗粒酶B是细胞毒性T细胞、NK细胞分泌的核心效应蛋白酶，可进入靶细胞激活凋亡通路，介导病毒感染细胞、肿瘤细胞的特异性杀伤。该抗体可特异性结合颗粒酶B抗原，精准检测免疫细胞中颗粒酶B的表达与分泌水平，评估细胞毒性免疫细胞的活化与杀伤功能；同时可中和颗粒酶B的蛋白酶活性，阻断其介导的靶细胞凋亡过程，抑制特异性细胞毒性免疫应答，助力研究抗肿瘤、抗病毒免疫及免疫损伤机制。
靶点背景
靶点背景：颗粒酶 B 储存于 CTL、NK 细胞毒性颗粒内，免疫杀伤激活后释放至靶细胞；
核心生理功能：穿透靶细胞启动 caspase 级联反应，介导病毒感染细胞、肿瘤细胞凋亡杀伤；
抗体作用特点：精准标记细胞毒性免疫细胞，流式分群 CTL/NK，IHC 评估肿瘤浸润杀伤细胞数量，肿瘤免疫、移植排斥、病毒免疫研究必备。
公司正在出售的产品
低亲和力球蛋白γFc区受体II-a/Fc γ RII a抗体 | Alexa Fluor 555标记的驴抗羊IgG H&L | PIGF Antibody Blocking Peptide |
锌指蛋白586抗体 | 生物素标记的小鼠抗兔IgM | BTBD10 Antibody Blocking Peptide |
鸭沙门氏菌抗体 | Alexa Fluor 350标记的兔抗人IgA | CK2 Antibody Blocking Peptide |
钠离子通道相关蛋白1抗体 | Alexa Fluor 350标记的兔抗人IgM | RETNLB Antibody Blocking Peptide |
丝裂原活化蛋白激酶MKK7抗体 | Alexa Fluor 555标记的小鼠抗大鼠IgG H&L | phospho-CDK6 (Tyr24) Antibody Blocking Peptide |
FAM208B蛋白抗体 | Cy5标记的羊抗牛IgG H&L | LRRC32 Antibody Blocking Peptide |
双氧化酶1/甲状腺氧化酶1抗体 | 颗粒酶B抗体Cy5标记的兔抗水貂IgG H&L | BACE Antibody Blocking Peptide |
基质金属蛋白酶21抗体 | Cy7标记的驴抗人IgG H&L | KCNMB2 Antibody Blocking Peptide |
同类型染色单体凝聚蛋白4抗体 | PE-CY5标记的小鼠抗人IgG H&L | Exportin 5 Antibody Blocking Peptide |
样本处理与实验操作
1. Western Blot（免疫印迹）
样本制备
细胞样本：PBS洗涤2-3次，加入RIPA裂解液（含1% PMSF和磷酸酶抑制剂），冰上裂解30分钟，12000rpm离心15分钟取上清，BCA法定量蛋白浓度
组织样本：液氮研磨成粉末，加入裂解液冰上裂解，离心后取上清，调整蛋白浓度至一致
变性处理：加入5×SDS上样缓冲液，95℃加热5-10分钟，冷却后上样
抗体孵育
转膜完成后，用5% BSA或牛奶封闭液室温封闭1-2小时
一抗稀释后4℃孵育过夜（12-16小时），或室温孵育1-2小时；孵育时保证膜完全浸没在抗体溶液中
TBST缓冲液洗涤3次，每次5分钟；加入二抗（1:5000-1:10000稀释）室温孵育1-2小时
再次洗涤后，用ECL发光液显影，通过凝胶成像系统采集图像
2. IHC-P（石蜡切片免疫组化）
样本前处理
脱蜡水化：依次放入二甲苯（2次，每次10分钟）、无水乙醇、95%乙醇、80%乙醇、70%乙醇（各5分钟），最后用PBS冲洗
抗原修复：将切片放入柠檬酸盐缓冲液（pH6.0）中，微波炉加热至沸腾，保持10-15分钟，自然冷却至室温
封闭处理：3% H₂O₂室温孵育10分钟灭活内源性过氧化物酶，PBS冲洗后用10%山羊血清封闭30分钟
抗体孵育
一抗稀释后滴加在切片上，4℃孵育过夜；孵育时置于湿盒中，防止液体挥发
次日室温复温30分钟，PBS冲洗3次，每次5分钟；加入二抗（生物素标记）室温孵育30分钟
PBS冲洗后，加入ABC复合物室温孵育30分钟，DAB显色剂显色（显微镜下观察控制时间，通常3-10分钟），苏木素复染后脱水封片
3. ICC/IF（细胞免疫荧光）
样本制备
细胞爬片培养至70-80%汇合度，PBS洗涤2次，4%多聚甲醛固定15-20分钟
通透处理（根据抗体类型选择）：0.1% Triton X-100室温孵育10分钟，PBS冲洗3次
封闭处理：5% BSA室温封闭30-60分钟，减少非特异性结合
抗体孵育
一抗稀释后滴加在爬片上，4℃孵育过夜，或室温孵育1-2小时
PBS冲洗3次，每次5分钟；加入荧光标记二抗（1:200-1:500稀释），室温避光孵育30-60分钟
再次冲洗后，用抗淬灭封片液封片，荧光显微镜或共聚焦显微镜下观察采集图像
4. ELISA（酶联免疫吸附试验）
包被与封闭
用包被缓冲液（如碳酸盐缓冲液pH9.6）稀释抗原至合适浓度，每孔加入100μl，4℃包被过夜
弃去包被液，PBST洗涤3次，每次3分钟；加入封闭液（5% BSA）每孔200μl，37℃孵育1-2小时
抗体孵育
一抗按比例稀释后，每孔加入100μl，37℃孵育1-2小时，或4℃孵育过夜
PBST洗涤3次，加入稀释好的酶标二抗，每孔100μl，37℃孵育1小时
洗涤后加入底物溶液（如TMB）每孔100μl，37℃避光显色10-20分钟，加入终止液（2M H₂SO₄），用酶标仪在450nm波长读取OD值
