产品名称：重组肠激酶

规格或纯度：无动物源,无载体,生物活性,ActiBioPure™,EnzymoPure™,≥5.0 U/μL

产品介绍：

肠激酶（Enterokinase, EK）是一种高度专一性识别 Asp-Asp-Asp-Asp-Lys 序列的蛋白酶，在 Lys 的 C端水解多肽。具有高度专一性，水解效率高的特点。可在较宽的 pH 范围(4.5~9.5)和较宽温度范围内有效切割融合蛋白。可除去位于蛋白质 N-末端的融合蛋白，以除去不需要的融合标签。重组肠激酶采用重组毕赤酵母高效分泌表达技术，经多级层析纯化，制成的高纯度、高活性重组牛肠激酶，不含其他蛋白酶。
产品优势
1、无动物源性：无动物病毒、无致病物质、无外源因子污染，安全性高。
2、 生产规模 1000L 以上。
3、 合规性：生产设备和生产环境符合相关法规要求，符合 GMP 指导原则。
4、质量文件完整：按客户需求，可提供相关法规支持文件。
产品特性
性状：无色至淡黄色澄明液体
pH：7.0~9.0
纯度：单一主条带
宿主蛋白残留： ≤100ng/mg pro.
外源性DNA残留 ：≤100ng/mg pro.
推荐使用方法
1、25℃酶切条件为：25mM Tris-HCl pH8.0 体系中融合蛋白 0.1-1mg/ml（蛋白总量 50-100μg），重组EK 0.1~2U,酶切 16~24 小时，用 SDS-PAGE 检测酶切效果。
2、4℃酶切条件为：可在 4℃对底物进行有效低温酶切，但需要将酶切时间延长至 48~64 小时，或增加 2-3倍酶量。低温酶切有时候可获得比 25℃更好的酶切效果。
3、 在＞200mM 咪唑，或＞200mMNaCl，或＞5%甘油，酶切效果会受影响。可参照以下推荐方法进行酶切：
1） 为获得理想酶切结果，请将样品透析到 25mM Tris-HCl pH 8.0 缓冲液中，再进行酶切；
2） 若不便透析，可将样品稀释，咪唑含量在 100mM 以下，NaCl 浓度在 50mM 以下，甘油浓度 5%以下进行酶切，酶的用量与蛋白的比例不变（即 1U 酶切 500μg 蛋白）；
3） 如果样品溶液中含有上述成分的一种或多种，且不便去除，此时适当增加酶量或延长酶切时间，也可达到较好酶切效果。
4、可对酶切条件进行优化，例如缓冲液 pH，融合蛋白浓度，EK 的量，以及酶切时间，融合蛋白能在稳定条件下被酶切，用 SDS-PAGE 检测酶切效果。
5、去除重组肠激酶的办法：可使用胰蛋白酶抑制剂亲和层析去除重组肠激酶。

注意：不建议 37℃条件下酶切，可能会有非特异性酶切出现。
运输和储存稳定性
1、运输稳定性：冰袋运输，活性稳定。
2、储存稳定性：-15℃及以下保存，24 个月稳定。25℃保存，一周内无活性损失。缓冲体系：50mM Tris-HCl，pH8.0，250mM NaCl，2mMCa2+，50%甘油。
3、冻融稳定性：反复冻融 5 次，无活性损失。
4、本品仅供研究使用，不得用于动物或人类的诊断或治疗。

生物活性：酶活性: ≥5.0 单位/微升。酶活定义：在 25℃，12~16 小时内，将 0.5mg 保存于 25mM Tris-HCI pH 8.0 缓冲液中的融合蛋白切割 95%所需的酶量为 1U。

无载体：Yes

无动物源：Yes

Accession #：P98072

预测分子量：25.8 kDa

SDS-PAGE：25.8±2.6 kDa

级别：无动物源, 无载体, 生物活性, ActiBioPure™, EnzymoPure™

储存缓冲液：50mM Tris-HCl, 250mM NaCl, 2mMCa2+, 50% Glycerol, pH 8.0

浓度：≥5.0 U/μL

储存条件：避光,-20°C储存,干燥,避免反复冻融

运输条件：超低温运输

稳定性与储存：-20℃ 储存（2年）；收货后建议分装，避免反复冻融；避光；密封。

CAS编号和信息：9017-74-8

酶学委员会编号：EC: 3.4.21.9

Accession #：P98072

生物活性：酶活性: ≥5.0 单位/微升。酶活定义：在 25℃，12~16 小时内，将 0.5mg 保存于 25mM Tris-HCI pH 8.0 缓冲液中的融合蛋白切割 95%所需的酶量为 1U。

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