产品名称：重组肠激酶冻干粉（牛）

规格或纯度：无动物源,无载体,生物活性,ActiBioPure™,EnzymoPure™,≥1000U/mg protein

产品介绍：

肠激酶（Enterokinase,EK）是一种高度专一性识别Asp-Asp-Asp-Asp-Lys序列的蛋白酶，在Lys的C端水解多肽。具有高度专一性，水解效率高的特点。可在较宽的pH范围(4.5~9.5)和较宽温度范围内有效切割融合蛋白。可除去位于蛋白质N-末端的融合蛋白，以除去不需要的融合标签。冀百康重组肠激酶冻干粉采用重组毕赤酵母高效分泌表达技术，经层析纯化、超滤、冷冻干燥制成的冻干粉。本品氨基酸序列来源于牛肠激酶序列，含有6个组氨酸标签（含6xHis-tag），不含其他蛋白酶。
产品优势
1、无动物源性：重组表达制备，无动物病毒、无致病物质、无外源因子污染，安全性高。
2、生产规模1000L以上，批间质量稳定。
3、合规性：生产设备和生产环境符合相关法规要求，符合GMP指导原则。
4、质量文件完整：按客户需求，可提供相关法规支持文件。
产品特性
外观：类白色粉末
蛋白含量： ≥20.0%
电泳纯度：单一主条带
推荐使用方法
1、25℃酶切条件为：25mM Tris-HCl pH8.0 体系中融合蛋白 0.1-1mg/mL（蛋白总量 50-100μg），重组EK 0.1~0.2U，酶切 16~24 小时，用 SDS-PAGE 检测酶切效果。
2、4℃酶切条件为：可在 4℃对底物进行有效低温酶切，但需要将酶切时间延长至 48~64 小时，或增加 2-3倍酶量。低温酶切有时候可获得比 25℃更好的酶切效果。
3、 在＞200mM 咪唑，或＞200mM NaCl，或＞5%甘油，酶切效果会受影响。

可参照以下推荐方法进行酶切：
1） 为获得理想酶切结果，请将样品透析或超滤换液到 25mM Tris-HCl pH 8.0 缓冲液中，再进行酶切；
2） 若不便透析，可将样品稀释，咪唑含量在 100mM 以下，NaCl 浓度在 50mM 以下，甘油浓度 5%以下进行酶切，酶的用量与蛋白的比例不变（即 1U 酶切 500μg 蛋白）；
3） 如果样品溶液中含有上述成分的一种或多种，且不便去除，此时适当增加酶量或延长酶切时间，也可达到较好酶切效果。
4、可对酶切条件进行优化，例如缓冲液 pH，融合蛋白浓度，EK 的量，以及酶切时间，融合蛋白能在稳定条件下被酶切，用 SDS-PAGE 检测酶切效果。
5、去除重组肠激酶的办法：可使用金属螯合亲和色谱去除重组肠激酶。
注意：不建议 37℃条件下酶切，可能会有非特异性酶切出现。
运输和储存稳定性
1、 运输稳定性：冰袋运输，活性稳定。
2、储存稳定性：干粉存于-15℃以下，24 个月稳定。配置溶解后分装储存于-15℃以下，反复冻融 3 次稳定；溶解后 2~8℃可保存 3 天。
3、本品仅供研究使用，不得用于动物或人类的诊断或治疗。

生物活性：酶比活：≥1000 单位/毫克 蛋白质。酶活定义：在25°C，12~16小时内，将0.5mg保存于25mM Tris-HCl pH8.0缓冲液中的融合蛋白切割95%所需的酶量为1U。

无载体：Yes

无动物源：Yes

Accession #：P98072

预测分子量：35 kDa

SDS-PAGE：35±7 kDa

级别：无动物源, 无载体, 生物活性, ActiBioPure™, EnzymoPure™

储存缓冲液：10mM Tris-HCl, pH 8.0

浓度：≥1000U/mg protein

储存温度：避光,-20°C储存,干燥,避免反复冻融

运输条件：超低温运输

稳定性与储存：-20℃ 储存（2年）；避免反复冻融；避光；密封。

CAS编号和信息：9017-74-8

酶学委员会编号：EC: 3.4.21.9

Accession #：P98072

生物活性：酶比活：≥1000 单位/毫克 蛋白质。酶活定义：在25°C，12~16小时内，将0.5mg保存于25mM Tris-HCl pH8.0缓冲液中的融合蛋白切割95%所需的酶量为1U。

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