禽嗜血杆菌染料法荧光定量PCR试剂盒

禽嗜血杆菌染料法荧光定量PCR试剂盒

商品属性

产品概述

本试剂盒采用染料法荧光定量PCR技术，专为禽嗜血杆菌（Avibacterium paragallinarum）核酸检测设计，适用于临床样本、环境样本或培养物的病原学快速检测。试剂盒包含优化反应体系，可实现对目标病原体的高特异性、高灵敏度检测，支持定性和定量分析。

试剂盒组成

反应体系：预混冻干粉末（含引物、探针、dNTPs、酶等），复溶后单次反应体积≥25μL。

阳性质控品：含禽嗜血杆菌特异性靶序列，用于实验有效性验证。

阴性质控品：无核酸酶水或无关序列，用于排除污染。

复溶剂：用于冻干粉末的溶解。

说明书（原件或彩页）。

保存条件与有效期

保存条件：-20℃避光保存，避免反复冻融。

有效期：12个月（自生产日期起）。

适用仪器

兼容主流荧光定量PCR仪，包括但不限于：

ABI 7500

安捷伦MX3000P/3005P

Bio-Rad系列

Eppendorf系列

检测性能

特异性：针对禽嗜血杆菌保守序列设计引物，与副猪嗜血杆菌（HPS）、禽源其他病原体无交叉反应。

灵敏度：可检测低至几百拷贝/反应的靶标核酸。

反应程序：

95℃预变性2分钟；

95℃变性10秒→60℃延伸35秒，共45个循环（FAM通道采集荧光信号）。

操作步骤

样本处理：按标准方法提取待测样本DNA。

试剂复溶：将冻干粉末与复溶剂混合，充分溶解后分装至反应管。

加样：每反应管加入模板DNA 2-5μL，阴性/阳性质控品各设1孔。

上机检测：按上述程序运行，仪器自动生成扩增曲线和Ct值。

结果判读

定性检测：

阳性：Ct值≤35，且扩增曲线呈典型S型；

阴性：Ct值≥40或无扩增；

可疑（35<Ct<40）：需重复检测，重复结果Ct<40判为阳性。

定量检测：以阳性质控品标准曲线计算样本拷贝数。

注意事项

实验需在无菌环境下操作，避免气溶胶污染。

试剂开封后建议分装保存，减少冻融次数。

不同仪器需根据说明书调整ROX参比染料的使用。

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