绵羊疱疹病毒通用染料法荧光定量PCR试剂盒

产品基本信息

规格：50次/盒（20μL反应体系）

保存条件：-20℃避光保存，有效期12个月。

运输条件：低温干冰运输。

适用样本：病毒DNA提取物（需用户自备）。

检验原理

本试剂盒基于SYBR Green荧光染料法，通过特异性引物扩增绵羊疱疹病毒保守基因序列，结合实时荧光定量PCR技术实现病毒核酸的定性与定量检测。特点包括：

高灵敏度：检测下限达100拷贝/反应。

高特异性：引物针对绵羊疱疹病毒通用保守区设计，与其他疱疹病毒无交叉反应。

即开即用：预混优化反应体系，减少操作步骤。

内控设计：含无传染性DNA阳性对照，避免假阴性。

试剂盒组成

| 成分 | 规格/数量 | 用途说明 |

| 2×qPCR预混液 | 500 μL（含染料） | 扩增反应主混合物 |

| 绵羊疱疹病毒引物混合液 | 100 μL | 特异性引物及探针 |

| 阳性对照（非活体DNA） | 50 μL（1×10^8拷贝/μL） | 标准曲线制备 |

| 模板稀释液 | 1 mL | 标准品/样品稀释 |

| DNA病毒裂解液（试用装） | 9 mL（15次） | 样本前处理（可选） |

适用仪器

兼容主流荧光定量PCR仪，包括：

ABI 7500/QuantStudio系列

安捷伦MX3000P/3005P

Roche LightCycler

Bio-Rad CFX系列

Eppendorf Mastercycler ep realplex

使用方法

1. 标准曲线制备（以10^1–10^6拷贝/μL梯度为例）

标记6管，分别加入45 μL模板稀释液。

梯度稀释阳性对照（起始浓度1×10^7拷贝/μL），每步换枪头，冰上操作。

2. PCR反应体系（20μL）

| 组分 | 体积（μL） |

| 2×qPCR预混液 | 10 |

| 引物混合液 | 2 |

| 模板DNA | 2 |

| RNase-free水 | 补至20 |

3. 扩增程序

95℃ 5 min（预变性）→ 95℃ 15 sec → 60℃ 30 sec（40循环，荧光采集）。

注意事项

操作分区：试剂配制、样本处理、扩增需严格分区。

避免污染：使用带滤芯枪头，阳性对照与样本分开操作。

临床限制：仅限科研使用，不可用于临床诊断。

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