转轮蟹通用染料法荧光定量PCR试剂盒 新品

产品特点

即开即用：用户仅需提供病毒DNA模板，操作便捷。

高特异性：基于转轮蟹通用保守序列设计引物，无交叉反应。

高灵敏度：检测下限可达数百拷贝/反应。

闭管检测：一管式荧光定量PCR，避免开盖污染。

适用范围：仅限科研使用，不可用于临床诊断。

规格及成分

| 成分 | 包装规格 | 管盖颜色 |

| 2×qPCR MagicMix | 500μL（棕色管） | - |

| 荧光PCR专用模板稀释液 | 1 mL（黄盖） | 黄盖 |

| 转轮蟹通用PCR引物混合物 | 100μL（白盖） | 白盖 |

| 阳性对照（1×10⁸拷贝/μL） | 50μL（红盖） | 红盖 |

| 使用手册 | 1份 | - |

运输与保存

运输条件：低温运输（冰袋或干冰）。

保存条件：-20℃避光保存，有效期12个月。

自备试剂

DNA模板（用户提供）。

10×ROX校正染料（需根据机型选择，详见使用方法）。

使用方法

阳性对照稀释（6个梯度）

标记离心管：编号7至2，分别对应10⁷–10²拷贝/μL梯度。

稀释步骤：

每管加45μL模板稀释液。

7号管加5μL阳性对照（10⁸拷贝/μL），震荡混匀，得10⁷拷贝/μL。

依次梯度稀释至2号管（10²拷贝/μL），每次更换枪头。

样品DNA制备

按常规方法提取样本DNA，建议浓度≥10 ng/μL。

PCR反应体系（20μL）

| 组分 | 体积 |

| 2×qPCR MagicMix | 10μL |

| 引物混合物 | 2μL |

| 模板DNA/阳性对照 | 2μL |

| ROX（按需） | 0.4μL|

| ddH₂O | 补至20μL |

扩增程序

预变性：95℃ 3分钟。

循环（40次）：95℃ 15秒 → 60℃ 30秒（采集荧光）。

熔解曲线分析：按仪器默认设置执行。

注意事项

阳性对照稀释需在独立区域操作，避免污染。

反应体系需避光配制，防止荧光淬灭。

不同机型需调整ROX浓度（参考仪器说明书）。

数据解释：以Ct值≤35且熔解曲线为单一峰判定为阳性。

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