毛样枝孢霉染料法荧光定量PCR试剂盒 新品

检验原理

本试剂盒基于SYBR Green I染料法实时荧光定量PCR技术，针对毛样枝孢霉基因保守区域设计特异性引物，通过荧光信号实时监测核酸扩增过程，实现定性及定量分析。

产品特点

高特异性：引物针对毛样枝孢霉保守序列设计，与相近物种无交叉反应。

高灵敏度：检测限可达几百拷贝/反应（或0.1 pg RNA/DNA模板）。

便捷性：预混式试剂，即开即用，仅需提供待测核酸模板。

防污染设计：一管式闭管检测，避免气溶胶污染。

适用范围：适用于科研用途（不可用于临床诊断）。

试剂组成

| 组分名称 | 规格/包装 |

| 2×qPCR预混液（含SYBR Green） | 500 μL（棕色管） |

| 毛样枝孢霉特异性引物混合物 | 100 μL（白盖管） |

| 阳性对照（1×10^8拷贝/μL） | 50 μL（红盖管） |

| 荧光PCR专用模板稀释液 | 1 mL（黄盖管） |

| 使用说明书 | 1份 |

自备试剂

DNA/RNA模板

10×ROX校正染料（根据仪器型号选配）

运输与保存

低温运输（冰袋或干冰），-20℃避光保存，有效期12个月。

使用方法

1. 阳性对照稀释（以10^2–10^7拷贝/μL梯度为例）

标记6管稀释液，依次加入45 μL专用稀释液，梯度稀释阳性对照（每次换枪头）。

稀释后置于冰上备用，避免反复冻融。

2. 反应体系配制（20μL/反应）

| 组分 | 体积（μL） |

| 2×qPCR预混液 | 10 |

| 引物混合物 | 2 |

| 模板DNA/稀释阳性对照 | 2 |

| RNase-free水 | 补足至20 |

3. 扩增程序

预变性：95℃ 5分钟

循环阶段（40 cycles）：95℃ 15秒 → 60℃ 30秒（采集荧光）

熔解曲线分析：60–95℃（仪器默认设置）

注意事项

操作需在独立洁净区域进行，避免交叉污染。

阳性对照需与待测样本分区域操作。

熔解曲线需呈现单峰，否则可能存在非特异性扩增。

质量控制

阴性对照：无扩增曲线（Ct值≥40或无信号）。

阳性对照：Ct值≤35，且熔解峰单一。

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