奥斯特奥斯特线虫染料法荧光定量PCR试剂盒 新品

检验原理

本试剂盒基于SYBR Green荧光染料法，通过实时荧光定量PCR技术检测奥斯特奥斯特线虫特异性基因保守区域。引物经优化设计，可高灵敏度、高特异性地扩增目标核酸，并通过荧光信号实时监测实现定性与定量分析。

试剂组成

PCR MagicMix 3.0：1 mL（含预混酶、dNTPs及缓冲液）

超纯水：1 mL（用于稀释或对照）

引物混合液：100 μL（特异性引物对）

阳性对照：50 μL（1×10^8拷贝/μL，黄盖）

阴性对照：50 μL（无核酸酶水）

说明书：1份

储存条件及有效期

储存：-20℃±5℃避光保存，避免反复冻融（建议分装使用）。

有效期：12个月（自生产日期起）。

适用仪器

兼容主流荧光定量PCR仪，包括：

ABI 系列（如7500、StepOnePlus）

Bio-Rad（CFX系列）

Roche LightCycler

Eppendorf Mastercycler

自备耗材与设备

无核酸酶离心管（0.2mL PCR管、1.5mL EP管）

滤芯吸头（10μL、200μL、1000μL）

离心机、振荡器、移液器

样本DNA提取试剂（可选配套核酸释放剂）

样品要求

样本类型：胃液分泌物、组织样本或培养物（需符合《临床微生物样本采集规范》）。

保存与运输：短期-20℃保存，长期-70℃；运输需使用2~8℃冰袋，避免反复冻融。

使用方法

样本处理：

提取样本DNA（推荐配套核酸提取试剂）。

阴性/阳性对照无需处理，直接使用。

反应体系配制（20μL/反应）：

模板DNA：2-5 μL

PCR MagicMix：10 μL

引物混合液：1 μL

超纯水：补足至20 μL

PCR程序：

预变性：95℃ 5分钟

循环阶段（40 cycles）：95℃ 15秒 → 60℃ 30秒（采集荧光）

数据分析：

通过阈值循环数（Ct值）判定结果，标准曲线法计算拷贝数。

注意事项

严格分区操作（样本处理、试剂配制、扩增检测）。

使用前充分混匀试剂并短暂离心。

避免气泡干扰，确保反应管密封。

实验后需用10%次氯酸或75%酒精消毒工作台。

废弃物按生物危害物处理。

质量控制

阳性对照：应出现典型扩增曲线，Ct值≤30。

阴性对照：无扩增信号（Ct值≥40或无信号）。

公司正在出售的产品