普氏立克次氏体染料法荧光定量PCR试剂盒

产品概述

本试剂盒基于染料法荧光定量PCR技术开发，专用于检测普氏立克次氏体（Rickettsia prowazekii）的核酸，适用于科研领域。试剂盒通过优化引物设计，确保高灵敏度和特异性，可检测低至1000拷贝/反应的靶序列，且与其他病原体无交叉反应。

产品特点

即开即用：用户仅需提供待测DNA模板，无需额外配制主反应混合液。

高灵敏度与特异性：引物针对普氏立克次氏体保守序列设计，灵敏度达1000拷贝/反应。

一管式检测：采用预混液形式，减少操作步骤及污染风险。

多用途分析：支持定性与定量检测，定量线性范围覆盖5个数量级（10^2–10^7拷贝/μL）。

配套对照：提供无传染性的DNA片段作为阳性对照，便于结果判读。

规格与成分

| 成分 | 包装规格 | 备注 |

| 2×qPCR MasterMix | 500 μL（棕色管）| 含SYBR Green荧光染料 |

| 荧光PCR专用模板稀释液 | 1 mL（黄盖管） | 用于标准品稀释 |

| 普氏立克次氏体引物混合物 | 100 μL（白盖管）| 预混特异性引物 |

| 阳性对照（1×10^8拷贝/μL）| 50 μL（红盖管）| 用于标准曲线制备 |

| 使用手册 | 1份 | 含详细操作流程 |

运输与保存

运输条件：低温运输（冰袋或干冰）。

保存条件：-20℃避光保存，有效期12个月。

自备试剂与仪器

自备试剂：待测DNA模板、10×ROX校正染料（需根据PCR仪器型号选择是否添加）。

仪器要求：荧光定量PCR仪（支持SYBR Green检测通道）。

使用方法

1. 阳性对照稀释（标准曲线制备）

标记6管稀释液（编号6至1），每管加入45 μL模板稀释液。

依次梯度稀释阳性对照（从10^7至10^2拷贝/μL），每步更换枪头，涡旋混匀后冰上暂存。

2. PCR反应体系配制

按20 μL体系配制：10 μL 2×MasterMix、2 μL引物混合物、2 μL模板DNA、6 μL无核酸酶水。

若仪器需ROX校正，额外加入0.4 μL 10×ROX。

3. 反应程序设置

预变性：95℃ 5分钟；

扩增循环（40次）：95℃ 15秒 → 60℃ 1分钟（采集荧光信号）；

熔解曲线分析：60–95℃（可选，用于特异性验证）。

注意事项

分区操作：阳性对照稀释需在独立区域完成，避免污染。

质量控制：建议每次实验均包含阴性对照（无模板对照）及标准曲线。

适用范围：仅限科研使用，不可用于临床诊断。

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