羌虫病立克次氏体染料法荧光定量PCR试剂盒

产品概述

羌虫病立克次氏体染料法荧光定量PCR试剂盒是一款专为科研场景开发的病原检测工具，基于羌虫病立克次氏体的保守基因序列设计高特异性引物，可实现对样本中该病原核酸的快速定性/定量检测。产品采用一管式封闭体系，整合了PCR扩增所需的核心试剂，无需用户额外配制，仅需加入样本DNA即可启动反应，既降低了操作复杂度，又能有效避免交叉污染。为羌虫病相关的流行病学调查、病原学研究提供高效可靠的技术支撑。

产品特点

即开即用：用户仅需提供样品DNA模板，无需额外优化反应体系。

高灵敏度与特异性：引物针对羌虫病立克次氏体高度保守区设计，灵敏度达几百拷贝/反应，无交叉反应。

双重检测功能：支持定性与定量分析，定量线性范围覆盖5个数量级（10^1–10^6拷贝/μL）。

内置对照：提供阳性对照（1×10^8拷贝/μL），便于排除假阴性结果。

防污染设计：一管式封闭检测，减少后续污染风险。

操作步骤

标准曲线制备（定量实验需执行）

标记6支离心管（7–2号），每管加入45 μL荧光PCR专用模板稀释液。

梯度稀释阳性对照：

7号管加入5 μL阳性对照（1×10^8拷贝/μL），震荡混匀得1×10^7拷贝/μL标准品，冰上保存。

依次稀释至2号管，获得6个浓度梯度（10^7–10^2拷贝/μL）。

样品DNA制备

使用兼容的核酸纯化方法提取样品DNA，需设置阳性/阴性对照（N+2个样本）。

qPCR反应（20 μL体系）

按需标记反应管（样本管、阴性对照管、标准曲线管）。

反应体系配置：

2×qPCR MagicMix（预混酶、dNTPs、染料）

模板DNA

优化引物（具体浓度参考说明书附录）。

上机程序：

预变性：95℃ 5分钟；

循环阶段：95℃ 15秒 → 60℃ 1分钟（40循环，荧光采集）。

注意事项

标准品稀释需在独立区域操作，避免污染其他组分。

实验废弃物需按生物安全规范处理。

不同批号组分不可混用。

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