里氏立克次氏体染料法荧光定量PCR试剂盒

产品概述

本试剂盒基于染料法荧光定量PCR技术开发，专用于检测里氏立克次氏体（Rickettsia risticii）的核酸，适用于科研用途（不可用于临床诊断）。试剂盒包含优化的引物、阳性对照及预混反应体系，具有高灵敏度和特异性，可进行定性与定量分析。

产品特点

即开即用：用户仅需提供待测DNA模板。

高灵敏度：检测限可达几百拷贝/反应，线性范围覆盖至少5个数量级。

特异性强：引物针对保守序列设计，避免与其他病原体核酸交叉反应。

质量控制：提供阳性对照（1×10⁸ 拷贝/μL），便于区分假阴性结果。

兼容性：支持多数荧光定量PCR仪，信号采集建议在复性或延伸步骤（激发波长471 nm，发射波长530 nm）。

包装规格

| 成分 | 规格/包装量 | 备注 |

| PCR MagicMix 3.0 | 1 mL（红盖） | 预混反应液 |

| 超纯水 | 1 mL（亮黄色） | 稀释模板用 |

| 引物混合液 | 100 μL（白盖） | 特异性引物 |

| 阳性对照 | 50 μL（黄盖） | 1×10⁸ 拷贝/μL |

| 使用手册 | 1份 | 操作指南 |

操作流程

1. 阳性对照稀释（10²-10⁷ 拷贝/μL梯度制备）

注意事项：操作需在独立区域进行，避免污染。

步骤：

标记6管，分别加入45 μL稀释液。

取5 μL阳性对照（1×10⁸ 拷贝/μL）加入第1管，震荡混匀，得10⁷ 拷贝/μL梯度，依次稀释至10² 拷贝/μL。

2. PCR反应体系（20 μL体系）

按比例加入预混液、引物、模板DNA及ROX校正染料（需自备）。

3. 上机检测

程序设置：95℃预变性2分钟；95℃ 15秒→60℃ 60秒（40循环）。

4. 数据分析

定量检测：以阳性对照log浓度为横轴、Ct值为纵轴绘制标准曲线，计算样本浓度。

定性检测：

阴性：Ct≥40；阳性：Ct≤35；

35<Ct<40需复测，复测Ct<40判为阳性。

保存与运输

保存条件：-20℃避光保存，有效期12个月。

运输方式：低温运输。

注意事项

本产品仅限科研使用。

避免反复冻融，开封后尽快使用。

操作时需穿戴防护装备，废弃物料按生物危害品处理。

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