热带利什曼原虫染料法荧光定量PCR试剂盒

产品概述

本试剂盒基于染料法荧光定量PCR技术，专为热带利什曼原虫（Leishmania tropica）的检测设计，适用于科研领域。试剂盒具有高灵敏度和特异性，可进行定性和定量分析，检测限可达数百拷贝/反应。

产品特点

即开即用：用户仅需提供样品DNA模板。

高特异性：引物针对热带利什曼原虫保守序列设计，避免交叉反应。

一管式检测：减少操作步骤，降低污染风险。

双功能应用：支持定性和定量检测，定量线性范围覆盖5个数量级。

配套齐全：包含阳性对照、阴性对照及专用稀释液，确保结果可靠性。

组分与规格

2×qPCR MagicMix（棕色管，500 μL）

荧光PCR专用模板稀释液（黄盖，1 mL）

热带利什曼原虫PCR引物混合物（白盖，100 μL）

阳性对照（1×10^8 拷贝/μL，红盖，50 μL）

阴性对照（DEPC-H2O）

注：50次反应体系（20 μL/次）。

样本要求

采集与保存：样本需低温运输（-20℃），保存期限1年，避免反复冻融。

DNA提取：推荐使用兼容性核酸提取试剂盒，确保纯度（OD260/280≈1.8-2.0）。

操作步骤

1. 标准曲线制备（定量检测适用）

将阳性对照按10倍梯度稀释（1×10^8至1×10^3拷贝/μL），分别标记为7至2号管。

每稀释步骤更换枪头，涡旋混匀后冰上保存。

2. 反应体系配制

每20 μL反应体系包含：

10 μL 2×qPCR MagicMix

2 μL 引物混合物

2 μL 模板DNA（待测样品/对照）

6 μL DEPC-H2O

3. 扩增程序

预变性：95℃ 5分钟

循环阶段（40 cycles）：95℃ 15秒 → 60℃ 30秒（采集荧光信号）

结果判读

定性检测：

阳性：Ct值≤35，且扩增曲线呈典型S型。

阴性：Ct值≥40。

可疑（35<Ct<40）：需重复检测，若Ct仍<40判为阳性。

定量检测：以标准曲线log值为横轴、Ct值为纵轴，计算待测样本浓度。

注意事项

实验分区操作（样本制备区、试剂配制区、扩增区），避免污染。

阳性对照需单独存放，防止交叉污染。

本产品仅限科研使用，不可用于临床诊断。

运输与储存

运输：泡沫箱加冰密封（-20℃）。

储存：-20℃避光保存，有效期12个月。

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