皱褶青霉染料法荧光定量PCR试剂盒

皱褶青霉染料法荧光定量PCR试剂盒

商品属性

检验原理

本试剂盒基于SYBR Green染料法荧光定量PCR技术，通过检测双链DNA结合染料的荧光信号实现靶标基因的定量分析。特点包括：

高灵敏度：检测下限达100拷贝/反应。

高特异性：引物针对皱褶青霉（Penicillium rugulosum）高度保守区设计，避免与其他生物DNA交叉反应。

多功能性：支持定性和定量检测，定量线性范围覆盖至少5个数量级。

即用型设计：用户仅需提供样品DNA模板，试剂盒包含预混MasterMix，简化操作流程。

试剂组成

2×SYBR qPCR MasterMix：0.5 mL ×1管（含DNA聚合酶、dNTPs、缓冲液及SYBR Green染料）。

荧光PCR专用模板稀释液：1 mL ×1管（用于标准品梯度稀释）。

超纯水：1 mL ×1管（阴性对照或稀释用途）。

阳性对照（部分版本提供）：含靶标基因片段，用于验证实验有效性。

操作流程

模板制备：提取待测样本DNA，建议浓度≥10 ng/μL。

反应体系配制：按20μL体系混合模板、引物、MasterMix及超纯水。

PCR程序设置：

预变性：95℃ 5分钟（复杂样本需延长至10分钟）。

循环阶段：95℃ 15秒 → 60℃ 30秒（40循环），荧光信号采集于延伸步骤完成时。

数据分析：通过标准曲线法或Ct值比较实现定量分析。

注意事项

避免污染：实验分区操作，使用无核酸酶耗材。

引物验证：若需自行设计引物，需通过BLAST验证特异性。

保存与运输：反复冻融≤3次，长期储存建议分装。

常见问题解决

无扩增信号：检查模板完整性或稀释阳性对照验证试剂活性。

非特异性扩增：优化退火温度或重新设计引物。

公司正在出售的产品