杂色青霉染料法荧光定量PCR试剂盒

杂色青霉染料法荧光定量PCR试剂盒

商品属性

产品概述

本试剂盒基于SYBR Green I染料法，专用于杂色青霉（Penicillium variabile）核酸的荧光定量PCR检测，适用于科研用途。试剂盒包含优化的预混体系，可实现高灵敏度、高特异性的定量分析，线性范围覆盖5个数量级（10^2–10^7拷贝/μL），支持定性和定量检测。

产品组分

2×荧光PCR预混液：含热启动DNA聚合酶、dNTPs及优化缓冲体系。

阳性对照：无传染性的杂色青霉特异性DNA片段（1×10^8拷贝/μL）。

模板稀释液：用于标准曲线制备。

RNase-free H₂O：确保无核酸酶污染。

技术参数

检测灵敏度：可检测低至10^2拷贝/μL的靶标。

重复性：复孔间Ct值差异≤0.5。

稳定性：预混液于4℃保存24小时性能不变。

适用仪器：兼容常见荧光定量PCR仪（含No/Low/High Rox平台）。

操作步骤

标准曲线制备（以10^2–10^7拷贝/μL为例）：

标记6管，分别加入45 μL模板稀释液。

梯度稀释阳性对照：取5 μL依次稀释至下一管，震荡混匀，获得6个浓度梯度的标准品。

冰上保存备用。

反应体系配制（20 μL体系）：

预混液10 μL + 模板2 μL + 引物混合液2 μL + H₂O 6 μL。

PCR程序：

预变性：95℃ 5分钟；

扩增：95℃ 15秒 → 60℃ 30秒（40循环）；

熔解曲线分析：60–95℃（每0.5℃采集信号）。

注意事项

防污染：操作需在独立区域，使用带滤芯枪头。

对照设置：每批次实验需包含阴性对照（以H₂O替代模板）。

储存条件：-20℃避光保存，避免反复冻融。

应用范围

适用于环境样本、微生物培养物中杂色青霉的核酸定量分析，不适用于临床诊断。

免责声明

本产品仅限科研使用，不提供活体阳性对照，操作需符合生物安全规范。

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