衣氏放线菌染料法荧光定量PCR试剂盒

衣氏放线菌染料法荧光定量PCR试剂盒

商品属性

产品概述

本试剂盒基于荧光定量PCR技术，专为快速、高灵敏度检测衣氏放线菌（Actinomyces israelii）设计，适用于科研用途。采用染料法（如SYBR Green I）实现DNA扩增的实时定量，具有高特异性和广线性范围（10^2–10^7拷贝/μL）。

产品特点

即开即用：用户仅需提供DNA模板，预混试剂含PCR所需全部成分（包括上样染料）。

高特异性：引物针对衣氏放线菌保守序列设计，无交叉反应。

质控完善：提供无传染性DNA片段作为阳性对照，便于排除假阴性。

兼容性：支持40μL或20μL反应体系，50次检测/盒。

试剂盒组成

PCR MagicMix 3.0（红盖，1 mL）：含DNA聚合酶、dNTPs及荧光染料。

超纯水（亮黄色，1 mL）：用于稀释或空白对照。

衣氏放线菌引物混合液（白盖，100 μL）：特异性引物对。

阳性对照（1×10^8拷贝/μL）：非活体DNA标准品。

操作步骤

标准曲线制备（10倍梯度稀释）

标记离心管（7–2号），每管加45 μL专用稀释液。

取5 μL阳性对照（10^8拷贝/μL）加入7号管，震荡混匀，得10^7拷贝/μL标准品。

依次稀释至10^2拷贝/μL（6–2号管），冰上保存备用。

PCR反应体系

推荐体系：20–40 μL（含模板DNA 2–5 μL）。

循环条件：预变性（95°C, 5 min）→ 40循环（95°C 15 s, 60°C 30 s）→ 熔解曲线分析。

注意事项

分区操作：阳性对照稀释需在独立区域进行，避免交叉污染。

储存条件：-20°C避光保存，避免反复冻融。

应用限制：仅限科研，不适用于临床诊断。

性能参数

检测限：≤10^2拷贝/μL。

线性范围：10^2–10^7拷贝/μL（R²≥0.99）。

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