呼吸道合胞病毒染料法荧光定量RT-PCR试剂盒

呼吸道合胞病毒染料法荧光定量RT-PCR试剂盒

商品属性

产品概述

本试剂盒基于SYBR Green I染料法，专用于呼吸道合胞病毒（RSV）RNA的荧光定量RT-PCR检测。通过优化的一管式反应体系，实现反转录与定量PCR同步进行，减少操作步骤并降低污染风险。适用于临床样本、环境监测及科研领域的病毒载量精准定量。

产品组分

2× RT-qPCR预混液：包含耐热反转录酶、热启动Taq DNA聚合酶及优化缓冲体系。

酶混合液：确保高效cDNA合成及靶标扩增。

无核酸酶水：用于反应体系配制。

阳性对照（非传染性DNA片段）：用于标准曲线建立及实验质控。

技术参数

灵敏度：可检测低至0.1 pg病毒RNA（高表达靶标）或1 pg（中低表达靶标）。

特异性：引物针对RSV高度保守区设计，无交叉反应。

线性范围：定量检测覆盖5个数量级（10²~10⁷拷贝/μL）。

稳定性：预混液于4℃保存24小时性能不变。

操作流程

样本处理：提取待测RNA，避免反复冻融。

标准曲线制备：

将阳性对照按10倍梯度稀释（10²~10⁷拷贝/μL），独立分区操作以防污染。

PCR反应体系配制：

每20 μL反应体系含10 μL 2×预混液、0.5 μL酶混合液、1 μL模板RNA及8.5 μL无核酸酶水。

程序设置：

反转录：50℃ 15分钟 → 预变性：95℃ 5分钟 → 扩增（40循环）：95℃ 10秒，60℃ 30秒（采集荧光）。

数据分析：通过熔解曲线验证扩增特异性，标准曲线计算病毒载量。

注意事项

实验需在无核酸污染环境下进行，建议使用带滤芯枪头。

阳性对照不可直接接触活病毒样本。

本试剂盒仅限科研或临床诊断使用，操作需符合生物安全规范。

储存与运输

储存条件：-20℃避光保存，避免反复冻融。

有效期：12个月。

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