呼吸道合胞病毒B型染料法荧光定量RT-PCR试剂盒

呼吸道合胞病毒B型染料法荧光定量RT-PCR试剂盒

商品属性

检测原理

基于实时荧光RT-PCR技术，靶向RSV-B型特异性基因序列（G蛋白基因可变区及L蛋白基因保守区），通过荧光探针标记实现RNA的定量检测。扩增曲线与Ct值判定结果，具备高特异性和灵敏度。

性能参数

检测范围：2×10³～1×10⁸ copies/mL

最低检测限：1×10³ copies/mL（灵敏度显著高于传统培养法）

特异性：≥99%，无交叉反应（如链球菌等常见呼吸道病原体）

检测时间：1-2小时（含核酸提取步骤）

操作流程

样本采集与保存

使用无菌拭子采集鼻咽/咽部分泌物，置于病毒保存液中（2-8℃保存≤72小时，长期需-70℃以下冻存）。

核酸提取

推荐磁珠法或柱提法提取RNA，避免RNA降解（操作需在生物安全柜内完成）。

PCR扩增

配制反应体系：加入模板RNA、引物探针混合液、酶预混液。

上机运行：按预设程序（逆转录→预变性→扩增）进行荧光信号采集。

结果分析

阳性判定：Ct值≤预设阈值且扩增曲线呈典型S型。

阴性判定：无扩增曲线或Ct值>阈值。

质量控制

内控标准：试剂盒含阳性对照（RSV-B RNA标准品）和阴性对照（无核酸酶水）。

实验环境要求：

分区操作（试剂准备区、样本处理区、扩增区），使用带滤芯吸头及紫外消毒设备。

RNA操作全程需低温（0-4℃）防降解。

注意事项

仅限专业医疗机构使用，结果需结合临床其他指标综合判断。

避免反复冻融试剂，使用前需充分混匀并瞬时离心。

实验废弃物需按生物危害品处理。

临床应用

适用场景：婴幼儿下呼吸道感染诊断、流行病学调查、疫苗效果评估。

优势：

快速高效：较传统培养法（24-48小时）大幅缩短时间。

自动化兼容：支持全自动核酸提取仪，适合批量检测。

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