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迟钝爱德华菌染料法荧光定量PCR试剂盒

Edwardsiella tarda?Dye-based qPCR Kit
￥3490 50T 起订
上海 更新日期：2026-03-13

上海博湖生物科技有限公司

VIP1年
联系人：博湖生物
电话：57763112拨打
手机：18930344717 拨打
邮箱：3004987436@qq.com

产品详情:

中文名称：
迟钝爱德华菌染料法荧光定量PCR试剂盒
英文名称：
Edwardsiella tarda?Dye-based qPCR Kit
品牌：
派瑞曼
产地：
国产
保存条件：
-20℃避光保存
产品类别：
PCR试剂盒 荧光定量PCR
检测方法：
PCR
种属反应性：
Edwardsiella
检测类型：
PCR检测
样品类型：
鱼类肠道组织、水体样本

迟钝爱德华菌染料法荧光定量PCR试剂盒

商品属性

产品名称

迟钝爱德华菌染料法荧光定量PCR试剂盒

英文名称

Edwardsiella tarda Dye-based qPCR Kit

规格

50T

货号

PR4533

产品概述

迟钝爱德华菌是一种人-鱼共患的革兰氏阴性条件致病菌，广泛存在于水体环境中，可引发鱼类大量死亡及人类感染。本试剂盒以染料法荧光定量PCR技术为核心，基于该菌高度保守的基因序列设计引物，能实现对样本中迟钝爱德华菌核酸的快速定性与定量检测，适用于水产养殖病害监测、公共卫生病原筛查及相关科研工作。2.png

产品特点

操作便捷：即开即用，用户仅需提供样本DNA模板，无需额外配制核心试剂

高特异性：引物针对迟钝爱德华菌保守区域设计，与其他近缘微生物无交叉反应

高灵敏度：检测下限可达100-1000拷贝/反应

宽线性范围：定量检测线性范围覆盖5个以上数量级

双重功能：可同时满足定性筛查与精确定量检测需求

污染防控：一管式封闭反应体系，有效避免产物污染

包装规格及成分

组分名称 规格 包装标识

2×qPCR MagicMix（含染料） 1mL 红盖管

超纯水 1mL 亮黄盖管

引物混合液 100μL 白盖管

阳性对照（1×10⁸拷贝/μL） 50μL 黄盖管

DNA抽提液（试用装） 9mL（15次用量） 透明管

使用手册 1份 -

运输与保存条件

运输：采用冰袋低温运输，避免冻融循环

保存：-20℃避光保存，有效期12个月

注意：阳性对照需单独存放，避免污染其他试剂；2×qPCR MagicMix避免反复冻融，频繁使用可分装后4℃短期存放（不超过1个月）

自备材料与仪器

材料：一次性无酶离心管、带滤芯吸头、一次性手套、口罩

仪器：荧光定量PCR仪、高速离心机、金属浴/PCR仪（用于核酸提取）、移液器（0.5-10μL、10-100μL、100-1000μL）

实验操作步骤

步骤1：阳性对照梯度稀释（用于定量检测）

标记6个离心管为2-7号

每管加入45μL荧光PCR专用模板稀释液

7号管加入5μL阳性对照，充分震荡1分钟，得到1×10⁷拷贝/μL的标准品

依次倍比稀释得到1×10⁶、1×10⁵、1×10⁴、1×10³、1×10²拷贝/μL的系列标准品，全程换用新吸头，操作区与样本区严格分离

步骤2：样本DNA提取

可使用试剂盒配套的DNA抽提液或商业化核酸提取试剂盒，以下为配套抽提液操作方法：

液体培养物：取100μL培养物→8000rpm离心3min→弃上清→加50μL抽提液混匀→100℃加热10min→13000rpm离心3min→取5μL上清作为模板

固体菌落：挑取单菌落→加入50μL抽提液混匀→100℃加热10min→13000rpm离心3min→取5μL上清

粪便/组织样本：取适量样本→加0.5mL生理盐水混匀→13000rpm离心3min→弃上清→后续操作同液体培养物

环境水样：取2-3mL水样→13000rpm离心3min→弃上清→后续操作同液体培养物

步骤3：荧光定量PCR反应体系配制（20μL体系）

组分 样品管/阴性对照管 阳性对照管（标准品）

2×qPCR MagicMix 10μL 10μL

引物混合液 2μL 2μL

样本DNA/超纯水 8μL -

系列标准品/超纯水 - 8μL

⚠️ 注意：阴性对照用超纯水替代模板；先配制样品管与阴性对照，最后添加阳性对照，避免污染

步骤4：PCR反应程序设置

阶段 温度 时间 循环数

预变性 95℃ 5min 1

扩增循环 95℃ 10sec 40

60℃ 30sec（采集荧光）

⚠️ 注意：荧光信号采集通道选择FAM通道（染料最大发射波长530nm），可根据仪器型号微调退火温度

结果判读

定量检测

以阳性对照浓度的对数为横轴，Ct值为纵轴绘制标准曲线

根据样品Ct值从标准曲线计算对应核酸浓度

标准曲线R²值应≥0.99，否则需重新实验

定性检测

阴性对照Ct值≥40且无扩增曲线

阳性对照Ct值≤30且有典型S型扩增曲线

待测样品判读标准：

Ct值≤35：阳性

35<Ct值<40：重复实验，若仍<40则判为阳性

Ct值≥40：阴性

常见问题及解决方法

常见问题 可能原因 解决方法

所有样品均无扩增曲线 试剂失活/操作失误 检查试剂保存条件，重新配制反应体系

阳性对照正常，样品无扩增 模板降解/浓度过低 使用新鲜样本，优化模板加入量（5-15%体系）

非特异性扩增严重 退火温度过低/引物浓度高 提高退火温度，优化引物用量

阴性对照出现扩增曲线 交叉污染 更换无菌耗材，严格分区操作，加强实验室消毒

注意事项

本产品仅供科研使用，不得用于临床诊断

实验全程佩戴手套口罩，使用无菌耗材，避免交叉污染

反应体系配制需在冰上操作，避免试剂反复冻融

PCR仪可能需要优化反应程序，建议进行温度梯度预实验

样本采集后应尽快处理，-20℃保存不超过1个月，避免反复冻融

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公司简介

派瑞曼pyram?是上海博湖生物科技有限公司（Shanghai Bohu Biological Technology Co., Ltd.，China）的产品品牌。 派瑞曼pyram?是一家化学、生化和材料科学等领域的科研用研发产品的制造商和供应商,我们的产品在相当宽的基础科学领域得到广泛的应用。 客户包括学术界、工业界和政府的研究和开发实验室以及制药、生物技术、化工/石化行业等具商业规模的企业。 派瑞曼pyram?除包括化学、分析化学、生命科学、材料科学和病理科学产品。质量是所有产品和服务最关键的组成部分,我们通过质量和实力赢得客户的信赖。产品的质量是企业的生命。 公司秉承"专注品质、诚信为本、服务至上、合作共赢"的企业文化积极参与生物领域的技术创新和技术服务,力求为我国科研事业更好的,更专业的服务！

成立日期 (13年)
注册资本 50.000000万人民币
员工人数 10-50人
年营业额 ￥ 300万-500万
经营模式 贸易
主营行业 生物化工,细胞培养,分子生物学,细胞生物学

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