犬细小病毒染料法荧光定量PCR试剂盒

犬细小病毒染料法荧光定量PCR试剂盒

商品属性

产品特点

即开即用：预混优化引物、探针及反应体系，用户仅需提供DNA模板。

高灵敏度与特异性：引物针对犬细小病毒保守区域设计，避免交叉反应，检测限可达10^2拷贝/μL。

双重检测功能：支持定性与定量分析，定量线性范围覆盖5个数量级（10^2~10^7拷贝/μL）。

闭管操作：一管式反应设计，降低气溶胶污染风险。

内控保障：含阳性对照（非活病毒，为DNA片段），便于区分假阴性结果。

组分清单（50次/20μL反应体系）

2×qPCR预混液（含染料） 500 μL

荧光PCR模板稀释液 1 mL

CPV特异性引物探针混合液 100 μL

阳性对照（1×10^8拷贝/μL） 50 μL

使用说明书 1份

储存与运输

储存条件：-20℃避光保存，有效期12个月（未开封）。

运输方式：低温干冰运输。

操作步骤

1. 样本处理

适用样本：病犬粪便、肠内容物、血清或组织（肠道、淋巴结）。

采集要求：

粪便/肠内容物：1g样本加入1mL PBS，匀浆后离心取上清。

组织：1g样本匀浆后离心取上清。

短期保存：2~8℃（≤24小时）；长期保存：-80℃（避免反复冻融）。

2. DNA提取

推荐使用QIAGEN或Roche核酸提取试剂盒，按说明书操作。

3. 荧光定量PCR反应

反应体系（20μL）：

2×qPCR预混液 10 μL

引物探针混合液 2 μL

DNA模板 2 μL

超纯水 补至20 μL

扩增程序：

预变性：95℃ 5分钟

循环阶段（40 cycles）：95℃ 15秒 → 60℃ 1分钟（采集荧光信号）

4. 结果分析

定量：根据标准曲线计算拷贝数。

定性：Ct值≤35判定为阳性。

注意事项

阳性对照需在独立区域稀释，避免污染。

实验需在符合生物安全标准的实验室进行。

不同机型可能需要调整ROX参比染料。

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