加利福利亚脑炎病毒染料法荧光定量RT-PCR试剂盒 新品

加利福利亚脑炎病毒染料法荧光定量RT-PCR试剂盒

商品属性

产品基本信息

规格：50次/盒（20μL反应体系）

保存条件：-20℃避光保存，有效期12个月，避免反复冻融（≤7次）。

适用仪器：ABI、MX3000P/3005P、LightCycler、Bio-Rad、Eppendorf等荧光定量PCR仪。

产品特点

高灵敏度与特异性：引物及探针针对病毒高度保守区设计，无交叉反应。

即开即用：用户仅需提供样品RNA模板，无需额外优化。

内控设计：含阳性质控品（非活病毒，为DNA片段）和阴性质控品，便于结果判读。

快速检测：适用于科研用途，不适用于临床诊断。

组分清单

反应液（100μL×1管）

阳性质控品（900μL×1管，10E8拷贝/μL）

阴性质控品（50μL×1管）

说明书（1份）

自备材料

无RNA/DNA酶的1.5mL离心管、0.2mL PCR反应管、滤芯吸头（10/200/1000μL）。

离心机、振荡混合器、移液器及配套耗材。

样本要求

样本类型：全血、血清、血浆、口腔拭子、病灶渗出物等（需避免交叉污染）。

采集与保存：

血液样本：EDTA抗凝管采集，立即混匀；

组织/分泌物：灭菌容器保存；

短期保存：-20℃；长期保存：-70℃以下。

操作步骤

1. 样本处理

按规范提取RNA，避免降解。

2. 阳性对照稀释（示例：10E2-10E7梯度）

在独立区域用专用稀释液进行10倍梯度稀释，冰上暂存。

3. PCR反应体系配制

反应液避光融化后混匀，短暂离心，按20μL/管分装至PCR管。

分别加入模板RNA（样本/对照），盖紧管盖避免气泡。

4. 上机检测

按仪器说明书设置程序：

逆转录：50℃ 15分钟；

预变性：95℃ 5分钟；

扩增：95℃ 15秒 → 60℃ 1分钟（40循环）。

注意事项

分区操作：样本处理、试剂配制、扩增需在不同区域进行。

防污染措施：使用一次性耗材，实验后以10%次氯酸或75%乙醇消毒台面及移液器。

质量控制：每批次实验需包含阴/阳性质控，结果无效需复检。

结果判读

阳性：Ct值≤35，且扩增曲线呈典型S型；

可疑：Ct值35-40，建议重复检测；

阴性：无Ct值或≥40。

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