轮状病毒通用染料法荧光定量RT-PCR试剂盒 新品

产品用途

科研用途，适用于轮状病毒核酸的定性及定量检测，严禁用于临床诊断。

产品特点

即开即用：优化预混体系，用户仅需提供病毒RNA样本。

高特异性：针对轮状病毒通用保守序列设计引物，避免交叉反应。

高灵敏度：检测下限为数百拷贝/反应，线性范围覆盖5个数量级。

防污染设计：一管式闭管检测，减少气溶胶污染风险。

包装成分

| 成分编号 | 组分名称 | 规格 | 包装颜色 |

| 2×qPCR MagicMix（预混液） | 500μL/管 | 棕色管 |

| 荧光PCR专用模板稀释液 | 1 mL | 黄盖 |

| 轮状病毒通用PCR引物混合物 | 100μL | 白盖 |

| 阳性对照（1×10^8 拷贝/μL） | 50μL | 红盖 |

实验操作指南

1. 样本准备

建议设置对照：

阳性对照（PC）：使用试剂盒提供的阳性对照（稀释至与样本体积一致）。

阴性对照（NC）：以无核酸酶水替代样本。

每批次需设置N+2个提取反应（N为样本数，额外增加PC和NC）。

2. RNA提取

兼容多数商业化RNA提取试剂盒，建议使用柱式法或磁珠法纯化。

3. 荧光定量PCR反应

反应体系（20μL）：

2×qPCR MagicMix：10μL

引物混合物：1μL

模板RNA：2μL

无核酸酶水：补至20μL

扩增程序：

| 步骤 | 温度 | 时间 | 循环数 |

| 逆转录 | 50℃ | 15 min | 1 |

| 预变性 | 95℃ | 5 min | 1 |

| 扩增 | 95℃ | 10 sec | 40 |

| | 60℃ | 30 sec | |

4. 结果分析

预期产物长度：约200 bp（可通过1.5%-2.0%琼脂糖凝胶电泳验证）。

有效性判定：若阴性对照出现扩增，表明污染，实验需重复。

注意事项

所有操作需在无核酸污染环境下进行，建议使用紫外线灭菌工作台。

阳性对照需单独存放，避免反复冻融（建议分装保存）。

本试剂盒检测结果需结合临床症状及其他实验室指标综合判断。

存储条件：-20℃避光保存，有效期12个月。

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