大鼠角膜基质细胞 新品

细胞简介：

大鼠角膜基质分离自眼角膜组织；角膜位于眼球前壁的一层透明膜，约占纤维膜的前1/6，从后面看角膜呈正圆形，从前面看为横椭圆形。角膜厚度各部分不尽相同，中央部薄。角膜有十分敏感的神经末梢，如有外物接触角膜，眼睑便会不由自主地合上以保护眼睛。为了保持透明，角膜并没有血管，透过外界空气、泪液及房水获取养份及氧气。角膜分为五层，由前向后依次为：上皮细胞层、前弹力层、基质层、后弹力层、内皮细胞层。角膜基质层是角膜的主要组成部分，占据角膜厚度的90%，由角膜基质细胞、胶原纤维和细胞外基质构成。角膜基质层缺损的修复主要由角膜基质细胞的增殖及分泌细胞外基质完成。角膜基质层具有结构规整，透明度高的特点，正常情况下角膜基质细胞分泌组成基质层的成分，维持角膜的透明度，此细胞对于角膜损伤的修复具有重要意义。角膜基质细胞，存在于角膜基质层中，在正常情况下，处于静止状态。但当角膜损伤时，不同上皮来源的因子及环境信号，将影响角膜基质细胞的应答反应，决定着角膜能否被修复。

产品信息:

产品名称 大鼠角膜基质细胞

组织来源 眼角膜组织

默认种属 大鼠

产品规格 5×10^5Cells/T25

方法简介 公司实验室分离的大鼠角膜基质采用胶原酶消化后组织贴块法制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。

质量检测 公司实验室分离的大鼠角膜基质经Vimentin免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

培养信息

培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率 每2-3天换液一次

生长特性 贴壁

细胞形态 梭形、多角形

传代特性 可传2-3代

消化液 0.25%

培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%

大鼠角膜基质细胞体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的最佳培养状态。

细胞培养步骤：

1. 细胞复苏

运输与接收：细胞以液氮冻存形式运输，收到后立即用75%酒精喷洒消毒细胞瓶，置于超净台内无菌操作。

复苏操作：将细胞瓶放入37℃、5% CO培养箱中静置3-4小时稳定状态，显微镜下观察细胞形态和密度，记录初始状态（建议40x、100x、200x各拍一张照片）。

2. 细胞传代

传代时机：当细胞密度达80%汇合度时进行传代。

操作步骤：

弃去旧培养基，用无钙镁PBS润洗细胞1-2次。

加入0.25%胰蛋白酶消化液（1-2 mL），37℃孵育1-2分钟，显微镜下观察细胞变圆脱落。

加入5 mL完全培养基终止消化，轻轻吹打使细胞完全脱落。

离心（1000 RPM，5分钟），弃上清，用1-2 mL培养基重悬。

按1:2比例分瓶传代（如T25瓶分至两个T25瓶），补充新鲜培养基至5 mL。

换液频率：每2-3天换液一次。

3. 细胞冻存

冻存液：使用无血清冻存液。

冻存步骤：细胞传代后，用胰蛋白酶消化并离心，重悬于冻存液，缓慢降温至-80℃，最终转入液氮长期保存。

公司正在出售的产品：

使用细胞进行实验，请注意以下几点：

代数控制：尽量在低代数（如P3-P10）进行实验，以防止因传代过多导致的遗传漂移或功能衰退。

操作轻柔：原代细胞对环境变化敏感，解冻和传代时需格外小心，避免机械损伤。

营养需求：它们往往需要更复杂的营养成分（如特定的生长因子、血清），普通的培养基可能无法满足其生长需求。