大鼠附睾上皮细胞
细胞简介 ：
大鼠附睾上皮分离自附睾组织；附睾（Epididymis）是一个由曲折、细小的管子构成的器官，一端接着输精管（Ductusdeferens），一端接着睾丸（Testis）的曲细精管，具体结构主要包括输出小管和附睾管。附睾紧贴睾丸的上端和后缘，可分为头、体、尾三部。精子离开睾丸后通过输出小管进入附睾。附睾具有暂存精液并分泌附睾液营养精子的功能，以促进精子的进一步成熟附睾的功能是暂存精子，促进精子的进一步成熟。精子在附睾内获得运动能力，总共停留8～17天，终达到功能上的成熟。在这个过程中，精子除了自身的因素，还受到附睾微环境的影响，这包括了一系列的物理、化学变化和精子形态的改变。可以说，附睾微环境正常稳定是附睾发挥促成熟这一功能的必要条件。若附睾的功能发生异常，精子则不能成熟，引起不育。附睾上皮含有主细胞、基细胞、亮细胞等几种类型细胞。基细胞，其顶部离附睾管腔有一定距离，在附睾各部分，其形态没有差别，一般认为是贮备细胞；另一种主细胞，是维持附睾生理功能的物质基础，在各区段的主细胞形态结构差别很大，这也反映出各区段的生理功能的差异。除上皮细胞外，附睾的管壁组织结构也有规律性的变化，附睾管起始段平滑肌有自发地节律性收缩，而尾部平滑肌就没有这种特点，仅在射精一瞬间出现强烈的节律收缩。作为负责提供适合精子成熟微环境的附睾，具有活跃的分泌与吸收功能。其中，附睾上皮的电解质和水分的转运，对保持附睾内合适的离子浓度和酸碱度，为精子成熟提供适宜的环境起着相当重要的作用。睾丸的支持细胞每天能产生大量睾网液，如一只公羊每天约能分泌40毫升睾网液，而从附睾排出的只不过几百微升，也就是说睾丸分泌液有99%被附睾上皮重新吸收回体内。动物实验表明，结扎输精管时睾丸不会肿胀，但若结扎睾丸输出小管，睾丸天就会肿胀，这就充分证实了附睾存在着强有力的吸收功能，但是重新吸收的意义尚不清楚。体外培养附睾上皮细胞对精子的发育、成熟，，附睾生理基础功能研究具有重要意义。
产品规格 | 5×10^5Cells/T25 | 英文名称 | Rat Epididymal Epithelial Cells |
生长特性 | 贴壁 | 细胞形态 | 上皮细胞样 |
货号 | XG-X4849 | 组织来源 | 附睾 |
产品信息：
产品名称 大鼠附睾上皮细胞
英文名称 Rat Epididymal Epithelial Cells
组织来源 附睾
默认种属 大鼠
产品规格 5×10^5Cells/T25
培养信息：
包被条件：鼠尾胶原Ⅰ（2-5μg/cm2）
培养基：含FBS、EGF、Hydrocortisone、肾上腺素、甲状腺素、Insulin、Transferrin、Selenium Solution、Penicillin、Streptomycin等
换液频率：每2-3天换液一次
生长特性：贴壁
细胞形态：上皮细胞样
传代特性：可传1-2代
消化液：0.25%
培养条件：气相：空气，95%；CO2，5%
大鼠附睾上皮细胞体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的最佳培
方法简介 实验室分离的大鼠附睾上皮采用胶原酶消化结合差速贴壁法制备而来，细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。
质量检测 实验室分离的大鼠附睾上皮经PCK免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
培养操作方法：
核心特点
高度生理相关性：保留了体内来源组织的结构、功能和基因表达特征。
有限寿命：与无限增殖的肿瘤细胞系不同，原代细胞增殖能力有限，经过一定次数的分裂后会进入衰老期，这更符合正常细胞的生理状态。
异质性：初始培养物通常是多种细胞类型的混合物，有时需要通过差速贴壁等方法进行纯化。
操作要求高：对培养环境、试剂质量和无菌操作的要求极为严格，培养难度大于永生化细胞系。
组织块培养法
取材与剪切
在无菌条件下取出组织，用Hanks液或PBS清洗，去除血污和脂肪、结缔组织等非目标成分。
用眼科剪将组织剪切成 0.5-1 mm3 的小块。
接种
用吸管将组织块均匀地贴附在培养皿或培养瓶的内表面，各组织块之间保持一定间距（约0.5 cm）。
吸去多余液体，将培养器皿翻转，放入 37℃、5% CO的培养箱中，静置 1-3小时，让组织块牢固贴壁。
加液培养
待组织块贴壁后，轻轻翻转培养瓶，从一侧缓慢加入足量的培养液，使组织块浸没在液体中，注意不要让液体直接冲击组织块，以免冲起。
继续在培养箱中静置培养。通常 3-5天 后可观察到细胞从组织块边缘长出。
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关键操作技巧与注意事项：
成功的原代培养依赖于严谨的细节控制：
严格无菌操作：这是实验成功的基石。所有操作需在生物安全柜中进行，试剂和耗材必须无菌。
保持静置：细胞接种后的最初24-48小时内，应保持培养瓶绝对静置，避免频繁取出观察或晃动，这有助于细胞贴壁和伸展。
优化消化过程：
消化时间要恰到好处，过长会损伤细胞，过短则细胞分散不佳。
胶原酶对组织的损伤较小，常用于分离活性要求高的细胞；胰蛋白酶作用较强，需严格控制时间。
酶液应新鲜配制，避免活性下降。
控制接种密度：原代细胞在低密度下不易存活，建议适当提高初始接种密度，以保证细胞间的相互作用促进其生长。
定期换液：根据培养基颜色变化（如变黄）或每隔2-3天更换一次培养液，以清除代谢废物并补充营养。
