结肠弯曲菌核酸检测试剂盒 新品

产品介绍：

结肠弯曲菌（Campylobacter coli, CC）核酸检测试剂盒是一种用于体外定性或定量检测样本中结肠弯曲菌核酸的分子生物学工具。该试剂盒主要用于食品安全（如猪肉、禽肉制品）和临床腹泻样本的病原体检测。

检测原理

目前市面上的试剂盒主要基于实时荧光定量PCR（qPCR）技术，部分采用恒温荧光法（LAMP）。

荧光定量PCR法（主流）：

原理： 采用TaqMan探针法，针对结肠弯曲菌基因组的高度保守区域（如aspartokinase基因、glyA基因或16S rRNA基因）设计特异性引物和探针。

信号检测： 在PCR扩增过程中，如果样本中含有结肠弯曲菌DNA，探针被水解，释放出荧光信号（通常为FAM荧光素），仪器实时监测并判读结果。

恒温荧光法（LAMP）：

原理： 针对靶基因的多个区域设计特异性引物，在恒温条件下进行快速扩增，通过荧光染料或浊度变化肉眼判读结果。

试剂盒组成（参考）

组分名称  规格/描述  作用

2×qPCR MasterMix  含酶、dNTPs、缓冲液  提供扩增反应环境

特异性引物/探针混合液  针对结肠弯曲菌保守区  确保检测特异性

阳性对照 (Positive Control)  已知浓度的DNA片段  验证试剂有效性

阴性对照 (Negative Control)  无菌水/TE缓冲液  监控污染情况

ROX参比染料 (部分试剂盒)  校正荧光信号  消除管间差异

�� 样本类型

食品样本（主要）： 猪肉、猪肠、禽肉、生乳等（需前增菌处理）。

临床样本： 腹泻患者粪便、肛拭子。

环境样本： 养殖场水源、土壤、污水。

�� 操作流程简述

样本前处理与增菌：

食品样本通常需在含抗生素的选择性培养基（如改良CCD肉汤）中进行微需氧增菌（37℃-42℃，48小时）。

核酸提取：

取增菌液或临床样本，使用细菌基因组DNA提取试剂盒提取总DNA。

配置反应体系：

将提取的DNA模板、PCR反应液、引物探针按比例混合。

上机检测：

放入实时荧光PCR仪（如ABI 7500、Bio-Rad CFX96等），设置FAM通道，运行程序（通常40个循环）。

结果分析：

定性： Ct值 ≤ 35-40 判为阳性（视具体说明书而定）。

定量： 依据标准曲线计算样本中细菌的浓度。

⚠️ 注意事项

临床与应用意义： 结肠弯曲菌是引起人类细菌性腹泻的重要病原体之一，其感染症状与空肠弯曲菌相似（发热、腹痛、血便）。在食源性致病菌监测中，该试剂盒用于快速筛查食品中的污染情况。

生物安全： 操作应在生物安全二级（BSL-2）实验室进行。

防污染： PCR检测极其灵敏，必须严格分区操作（试剂准备区、样本处理区、PCR扩增区），防止扩增产物气溶胶污染导致假阳性。

结果解读： 阳性结果提示存在结肠弯曲菌核酸，但需结合培养结果和流行病学史综合判断。对于食品检测，若初筛阳性，建议进行分离培养以确认活菌存在。

公司正在出售的产品：

主要应用：

转基因作物检测：快速筛查Bt棉花、Bt玉米等

食品/饲料监管：标识转基因成分是否符合法规（如中国GB 2760、欧盟EC 1829/2003）

环境监测：土壤或农产品中Bt基因残留分析

操作流程

样本处理：研磨植物组织或均质化食品样本

DNA提取：推荐CTAB法或商业化提取试剂盒

PCR扩增：

反应体系：20 μL（含15 μL反应液+5 μL DNA模板）

扩增程序：95℃ 2min → (95℃ 15s → 60℃ 30s)×40循环