类志贺邻单胞菌核酸检测试剂盒 新品

 产品介绍：

类志贺邻单胞菌（Plesiomonas shigelloides）核酸检测试剂盒是一种用于体外定性检测类志贺邻单胞菌核酸的分子诊断产品。该菌是一种人畜共患的食源性致病菌，可引起腹泻、肠炎甚至败血症。

检测原理

该试剂盒主要基于实时荧光PCR技术（TaqMan探针法）或普通PCR技术。

特异性检测：针对类志贺邻单胞菌的保守基因序列（如gyrB基因、16S rRNA 基因或特异性毒力基因）设计特异性的引物和探针。

荧光/扩增信号：

荧光法：在PCR扩增过程中，随着目标DNA片段的指数级扩增，荧光信号增强，仪器根据Ct值判读结果。

普通PCR法：扩增结束后需通过琼脂糖凝胶电泳观察条带大小（如551bp）来判断结果。

恒温扩增（LAMP）：部分试剂盒采用LAMP技术，在恒温下进行扩增，通过浊度或荧光染料变化判读，无需复杂仪器。

核心组成

试剂盒（以常见的50T规格为例）通常包含：

PCR反应液/预混液：含缓冲液、dNTPs、特异性引物和荧光标记探针（荧光法）或引物混合液（普通法）。

酶混合液：含热启动Taq DNA聚合酶（PCR法）或Bst DNA聚合酶（LAMP法）。

阳性对照：含有类志贺邻单胞菌目标基因片段的质粒或灭活菌液（浓度通常为1×10⁸ copies/μL）。

阴性对照：无核酸酶的水。

核酸释放剂（部分赠送）：用于快速裂解细菌释放DNA。

适用样本与操作流程

适用样本类型：

粪便样本：患者腹泻粪便或肛拭子。

食品样本：水产品（如鱼、虾、蟹）、肉类等。

环境样本：水源、海水等。

标准操作流程：

样本前处理：

粪便/食品：需进行增菌培养（如37℃培养16-20小时），取增菌液提取DNA。

菌落：挑取单克隆菌落进行煮沸裂解或试剂提取。

DNA提取：使用试剂盒提取细菌基因组DNA。

体系配置：将DNA模板、PCR反应液和酶液按比例混合。

上机扩增：在荧光定量PCR仪或普通PCR仪上运行程序。

结果分析：

荧光法：Ct值≤35-40判为阳性。

电泳法：出现预期大小的特异性条带判为阳性。

✨ 产品特点

高特异性：引物经过精心优化，只扩增类志贺邻单胞菌，与其他肠道菌（如大肠杆菌、沙门氏菌）无交叉反应。

灵敏度高：最低检测限通常可达 10³ CFU/mL，部分试剂盒可直接检测未经培养的样本。

快速简便：相比传统培养法（需48-72小时），PCR法可在数小时内出结果。

⚠️ 注意事项与储存

储存条件：试剂盒需在 -20℃ 条件下避光保存，避免反复冻融。

有效期：一般为12个月。

增菌必要性：由于粪便和食品样本中杂菌多、抑制物多，通常建议先增菌再检测，以提高检出率。

生物安全：操作阳性对照和样本时需在生物安全二级（BSL-2）实验室进行。

�� 应用意义

临床诊断：辅助诊断由类志贺邻单胞菌引起的急性腹泻、胃肠炎，特别是在旅行者腹泻和海鲜中毒病例中。

食品安全：用于水产品和食品加工环节的卫生质量监控。

公共卫生：用于食源性疾病暴发的溯源调查和环境监测。

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检测性能优势：

高灵敏度

最低检出限达100-500拷贝/mL，显著高于传统培养法（需10-10 CFU/mL）。

强特异性

采用荧光探针法，避免与其他链球菌交叉反应，特异性≥99%。

二、临床应用价值

快速出结果

全程检测时间1-2小时（含核酸提取），较培养法（24-48小时）效率提升显著。

自动化兼容

支持批量样本处理，可搭配全自动核酸提取仪，适合大规模筛查。

三、操作便捷性

样本类型灵活

适用于阴道拭子、直肠拭子及尿液样本，采集后可直接检测。

操作简化

部分试剂盒采用一体化设计（如卡尤迪产品），减少人工操作步骤