百日咳杆菌核酸检测试剂盒 新品

产品介绍：

百日咳杆菌核酸检测试剂盒（通常基于实时荧光PCR技术）是专为体外定性检测临床鼻咽拭子或痰液等样本中百日咳杆菌（Bordetella pertussis）核酸而设计的诊断工具。

病原体背景与临床意义

百日咳杆菌是引起百日咳（Pertussis/Whooping Cough）的病原体，这是一种具有高度传染性的急性呼吸道疾病。

致病特点： 所有年龄段人群均易感，但婴幼儿及儿童感染后病情较重，典型症状包括阵发性痉挛性咳嗽、咳嗽后伴有“鸡啼样”吸气声或呕吐。

流行趋势： 近年来，中国百日咳感染有上升趋势，且发病高发季节通常在3-9月份。

诊断价值： 核酸检测（PCR）具有高灵敏度和特异性，是百日咳早期诊断的关键手段，尤其在抗生素治疗前进行检测，可显著提高检出率。

检测原理：实时荧光PCR

试剂盒通常采用TaqMan荧光探针法，通过PCR扩增细菌特异性基因片段来实现检测。

样本处理： 从鼻咽拭子、痰液或肺泡灌洗液中提取总DNA。

PCR扩增： 利用特异性引物对百日咳杆菌的保守基因进行扩增。

荧光检测：

FAM通道： 标记针对百日咳杆菌特异性基因的探针（常用靶标为IS481、IS1001或PT基因）。IS481在百日咳杆菌基因组中多拷贝存在，有助于提高检测灵敏度。

内标通道（如ROX/CY5）： 检测人源基因（如RNase P），用于监控样本采集质量（确认采到人细胞）及排除PCR抑制。

结果判读： 若FAM通道出现典型S型扩增曲线且Ct值≤38-40，判定为百日咳杆菌核酸阳性。

试剂盒组成

标准配置通常包含以下组分：

组分名称  主要成分与功能

PCR反应液  含dNTPs、缓冲液、Mg²⁺。

DNA聚合酶  热启动Taq酶（部分试剂盒包含UNG酶，用于防止残留污染）。

引物/探针混合物  预混液，包含针对百日咳杆菌及内标的特异性引物和荧光探针。

阳性对照  含百日咳杆菌目标基因片段的质粒或灭活菌体。

阴性对照  无核酸酶水，用于监控污染。

�� 样本要求与处理

适用样本：

鼻咽拭子（首选）： 使用涤纶或尼龙植绒拭子，避免使用棉拭子（可能含抑制物）。

鼻咽抽吸物、痰液： 也可用于检测。

采集时机： 最好在发病3周内采集，此时细菌载量最高，检出率最佳。超过4周，细菌排出减少，检出率下降。

保存与运输： 样本采集后应立即放入病毒/细菌保存液中，2-8℃运输，长期保存需置于-70℃或以下。

�� 性能特点

高特异性： 仅针对百日咳杆菌，不与肺炎链球菌、结核分枝杆菌、肺炎支原体等其他呼吸道病原体发生交叉反应。

高灵敏度： 最低检测限通常可达 1.0×10⁴ copies/mL，显著高于传统的细菌培养法。

快速高效： 整个检测流程（含核酸提取）通常在2-3小时内完成。

⚠️ 注意事项

抗生素影响： 虽然PCR检测不受既往抗生素治疗的严重影响，但有效的抗生素治疗（如红霉素）21天后，仍可能检出细菌DNA，需结合临床病程解读。

生物安全： 百日咳杆菌对外界抵抗力较弱，但操作原始样本仍需在生物安全二级（BSL-2）实验室进行。

结果解读： PCR阳性结果提示样本中存在百日咳杆菌核酸，但需结合患者临床症状、流行病学史及外周血淋巴细胞计数等指标进行综合确诊。

公司正在出售的产品：

主要应用：

转基因作物检测：快速筛查Bt棉花、Bt玉米等

食品/饲料监管：标识转基因成分是否符合法规（如中国GB 2760、欧盟EC 1829/2003）

环境监测：土壤或农产品中Bt基因残留分析

操作流程

样本处理：研磨植物组织或均质化食品样本

DNA提取：推荐CTAB法或商业化提取试剂盒

PCR扩增：

反应体系：20 μL（含15 μL反应液+5 μL DNA模板）

扩增程序：95℃ 2min → (95℃ 15s → 60℃ 30s)×40循环