SNU-C1人结肠癌细胞（STR） 新品

A、复苏细胞处理方法：培养至良好状态后灌满完全培养液并封好瓶口是运输细胞的最好办法。收到细胞用75%酒精喷洒整个细胞瓶，严格无菌后将细胞瓶放置培养箱中静置2-4小时以稳定细胞状态。静置后显微镜观察细胞生长情况，并对细胞进行不同数拍照保存（最好40x,100x,200x各一张），前三天照片是重要售后依据，不提供照片默认收到状态良好。

B、冻存细胞处理方法：收到细胞后，观察泡沫箱中干冰是否有剩余，冻存管是否完好无损是否有解冻情况，若发现干冰完全汽化或冻存管有解冻破损现象，请及时拍照并与我们联系。如果细胞签收三天内未与我们联系，则默认为收货良好。复苏第一管如有活性问题，请及时联系我们，技术人员与您沟通指导后再复苏第二管，未与我方联系擅自复苏第二管出现问题不予售后。

三、细胞培养步骤

细胞传代：如果细胞密度超80%，即可进行传代培养，具体步骤如下：

方法A、

1) 离心收集细胞，1000 rpm条件下离心5-8min，弃去上清液，补加 1-2mL培养液后吹匀；

2) 将细胞悬液按 1:2 的比例分到新的含 5-6 mL 完全培养基的T25培养瓶中或6cm培养皿中。（即1个T25瓶传代接种至2个T25瓶或者2个6cm的培养皿）

方法B、对于较难培养的细胞或新手，可离心收集细胞至T25瓶，按以下方法培养：

竖瓶子培养，完培只需要3-4ml培养，过48小时之后看状态，细胞密度没有起来的话，再往瓶子补加1ml的完培，继续过48小时之后看培养状态，密度起来的话，再往瓶子补加1ml的完培，继续过48小时之后看培养状态，这个时候应该密度高起来了，就可以收集液体离心1:2传代，每瓶竖着培养液也是3-4ml的完培培养。

C、细胞冻存：收集细胞悬液，1000rpm 条件下离心 5-8min，去除上清，按冻存数量（推荐每支冻存管5×10⁶左右细胞数量冻存），加入1ml的我司无血清冻存液（货号：C7001），轻轻混匀后，放-80℃冰箱，24小时后转入液氮罐中。

D、细胞复苏：从液氮灌或-80℃冰箱中找到需要复苏的细胞，水浴锅提前打开预热37℃。

1) 将冻存细胞在37℃水浴中迅速摇晃解冻；

2) 将冻存管中的细胞移至含5ml完全培养基的离心管中，1000 rpm离心5min；

3) 弃去上清液，补加5mL完全培养基后吹匀，接种于T25培养瓶中（或6cm皿中），培养过夜，第二天换液并检查细胞密度。

五、售后服务告知书

1）细胞出现问题，可重发的情况有哪些？判定标准是什么？

1. 细胞运输途中遭遇的各种问题，细胞丢失、瓶身破损、培养液严重漏液等，重发；

2. 细胞污染问题，请在收到产品48小时内，给我们提出真实的实验结果，核实后重发；

3. 常温发货的细胞静置24小时后，干冰冻存发货的细胞复苏后24小时后，绝大多数细胞未存活，（需提供真实清晰的细胞状态照片），重发；

4. 干冰冻存发货的细胞复苏后24小时后或常温发货的细胞静置4小时候并且未开封，出现污染，重发；

5. 细胞活性问题，请在收到产品7天内给我们提出真实的实验结果，用台盼蓝染色法鉴定细胞活力，核实后予重发；

6. 细胞收到当天以及第2,3天请拍照，3天未告知的，视为产品合格。4-7天内出现问题有提供收到细胞前3天照片和细胞出现问题时照片以及细胞相关操作的详细步骤的，并跟技术人员沟通的，由技术人员判定为我方责任的，重发。技术人员判定为双方承担责任的由双方进行协商处理或者按合同价的50%收费重发。

二）细胞出现问题，不予以重发的情况有哪些？

1. 客户造成细胞污染，不重发；

2. 客户不正确操作致细胞状态不好，不重发；

3. 非本库推荐细胞培养体系致的细胞状态不好，不重发；

4. 细胞状态不好，未提供细胞培养前3天照片的，不重发；

5. 细胞培养时经其它处理的，不重发；

6. 细胞收到2天内，未告知，不重发；

7. 视具体情况而定。