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细菌蛋白提取液

品牌：MedChemExpress (MCE)

货号：HY-K0002

产品活性：MCE 细菌蛋白提取液整合了溶菌酶和核酸酶双重活性，专为大肠杆菌裂解设计，可在温和条件下快速破坏细胞壁肽聚糖结构，高效释放胞内蛋白。同时配方中的核酸酶可同步降解基因组 DNA/RNA，显著降低裂解液黏度，减少核酸干扰，从而最大程度保持蛋白的天然状态与功能完整性。

描述及优势：菌体裂解方法主要分为物理法和化学法。 物理方法如超声、高压均质、研磨及冻融等，不引入外源化学试剂，成本低、效率高，但也存在局限：超声可能因局部升温导致蛋白变性；研磨和冻融通量有限，裂解效率不稳定；物理破碎产生的高黏度团聚也可能影响后续蛋白纯化效果。 化学方法包括有机溶剂、酸碱裂解以及溶菌酶处理等，适用于较大或较小体积样品，操作灵活。其中酸碱裂解效率虽高，但条件较为剧烈，易破坏蛋白天然结构，多用于质粒等特殊应用；部分化学试剂也可能导致蛋白失活，因此应用范围相对受限。 MCE 细菌蛋白提取液整合了溶菌酶和核酸酶双重活性，专为大肠杆菌裂解设计，可在温和条件下快速破坏细胞壁肽聚糖结构，高效释放胞内蛋白。同时配方中的核酸酶可同步降解基因组 DNA/RNA，显著降低裂解液黏度，减少核酸干扰，从而最大程度保持蛋白的天然状态与功能完整性。 本品适用于重组蛋白表达、蛋白功能分析、WB/SDS-PAGE 前处理等多种细菌蛋白样本制备场景，是实验室细菌蛋白获取的高效解决方案。

操作流程：菌体收集 采用离心或其他适宜方式收集经确认表达目的蛋白的菌体。弃去发酵液上清，对菌体进行称重并记录湿重。 菌体裂解 1. 菌体重悬 按 1 g 湿菌体加入 9 mL Tris-HCl 或 TBS (20 mM Tris, 150 mM NaCl, pH 7.6) 缓冲液的比例制备均一菌悬液。 注：不建议使用 PBS，因为 PBS 可能轻度抑制核酸酶活性；若必须使用，可适当延长裂解时间。 2. 细菌裂解 1) 裂解液用量：按 1 g 湿菌体对应 1 mL 裂解液的比例向上述细菌悬液中加入细菌蛋白提取液，充分混匀 (可根据总体积选择合适的混匀方式)。 2) 裂解条件：将混合样品置于 4-25°C 条件下，根据目的蛋白稳定性选择温度，裂解 1-10 min。裂解过程中菌悬液会逐渐转为澄清透明。 注：a. 若目的蛋白为可溶蛋白，建议快速裂解 (~1 min)，可释放 > 80% 的目标蛋白至上清。 b. 若目的蛋白为包涵体蛋白，建议适当延长裂解时间，以充分破壁并提升包涵体纯度。 3. 裂解后处理 裂解完成后进行离心 (> 8,000 g)，分离上清与沉淀。 若目的蛋白为可溶蛋白：收集上清用于后续纯化。 若目的蛋白为包涵体蛋白：收集沉淀并进行洗涤、变性/复性处理，然后按需选择适合的纯化方法。

详情参考：https://www.medchemexpress.cn/inhibitor-kit/bacterial-protein-extraction-reagent.html