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人 iPSC/ESC 皮质脑成熟培养基

品牌：MedChemExpress (MCE)

货号：HY-K6504

产品活性：MCE 人 iPSC/ESC 皮质脑类器官成熟培养基是一款专为皮质脑类器官长期维持与成熟阶段设计的即用型培养体系，用于衔接诱导分化的培养过程并支持类器官的持续生长。人源多能干细胞 (PSC) 定向分化形成皮质脑类器官后更换为本培养基，可显著提高类器官的活力与稳定性，使培养周期可稳定延长至 180 d。

描述及优势：MCE 人 iPSC/ESC 皮质脑类器官成熟培养基是一款专为皮质脑类器官长期维持与成熟阶段设计的即用型培养体系，用于衔接诱导分化的培养过程并支持类器官的持续生长。人源多能干细胞 (PSC) 定向分化形成皮质脑类器官后更换为本培养基，可显著提高类器官的活力与稳定性，使培养周期可稳定延长至 180 d。

操作流程：需要用户自己准备的试剂和耗材 1. DPBS (MCE Cat. No.: HY-K3008) 2. 干细胞基底膜基质胶 (MCE Cat. No.: HY-K6006) 3. iPSC/ESC 无酶消化液 (MCE Cat. No.: HY-K6020) 4. CEPT Cocktail Plus (1000×) (MCE Cat. No.: HY-K6021) 5. 基质选择性温和消化液 (MCE Cat. No.: HY-K6022) 6. 人 iPSC/ESC 皮质脑类器官诱导分化试剂盒 (MCE Cat. No.: HY-K6301) 7. 人多能干细胞 (PSC) 专用培养基 (MCE Cat. No.: HY-K6501) 8. 设备耗材：6/96 孔板 (低吸附)、排枪 (8-12 通道) 等 使用说明 (以6 孔板为例) 人 iPSC/ESC 皮质脑类器官诱导分化试剂盒 (MCE Cat. No.: HY-K6301) 理论上可形成不少于 100 个脑类器官。建议首次诱导时以 1 个六孔板作为起始条件，以获得约 60-100 个大小均一的神经上皮球 (理想形成率约 60%)。 1. (参考 HY-K6301 说明书) 神经上皮球诱导与神经莲座扩张 使用人 iPSC/ESC 皮质脑类器官诱导分化试剂盒 (MCE Cat. No.: HY-K6301)，诱导 PSC 形成神经上皮球并启动神经莲座结构扩张。当神经球中心和外侧出现黑色的斑点状结构说明神经莲座结构时，说明扩张阶段已达到成熟阶段，完全弃去原培养基。 2. 转入成熟培养阶段 每孔加入 2 mL 人 iPSC/ESC 皮质脑类器官成熟培养基，放入十字/旋转摇床 (80 rpm) 培养 18-26 d，每 2-3 d 换液一次。成熟的脑类器官即可用于鉴定和下游实验。使用脑类器官成熟培养基长期于摇床培养可以培养至 120 d 中心细胞不出现凋亡。 注：成熟的脑类器官经免疫荧光 (IF) 染色可观察到 TUJ1+ 神经元与 SOX2+ 放射状胶质细胞形成脑室区 (VZ) 和亚脑室区 (SVZ) 层状结构；通过 qPCR 可检测到 SLC17A6/VGLUT2 等谷氨酸能标志基因表达量提升 3-5 倍。 3. (参考 HY-K6301 说明书) 类器官体积调控 当皮质脑类器官培养至直径大于 1 mm 以上时，对其进行切割以减少内部细胞凋亡的情况，切割处理后每天换液 (去除切割应激产生的凋亡碎片)，继续培养 (80 rpm) 4 d。 4. 长期维持培养 4 d 后更换为脑类器官成熟培养基，于 37°C、120 rpm 继续维持培养，可延长培养时间和类器官活性至 180 d。 注：培养期间可通过 TUNEL 监测类器官中心坏死比例，并结合突出标志素 (如 Synaptophysin) 等标志物的表达水平评估其成熟度和功能状态。

详情参考：https://www.medchemexpress.cn/inhibitor-kit/human-ipsc-esc-cortical-brain-organoid-maturation-medium.html