转基因水稻品系LLRICE601核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法) 新品

 产品介绍：

检测原理与目的

检测原理：基于 实时荧光定量 PCR（qPCR） 技术，采用 TaqMan 荧光探针法。试剂盒中含有针对 LLRICE601 品系特异性设计的引物和探针（通常靶向 PAT 基因 及品系特异性边界序列）。

核心目的：用于水稻及其衍生产品（如米粉、加工食品等）中 LLRICE601 转基因品系 的高特异性检测和定量分析。

特异性鉴定：专一性地检测样品中是否含有 LLRICE601 品系，避免与其他植物或动物 DNA 交叉反应。

定量分析：通过监测荧光信号的累积（Ct值），计算样品中 LLRICE601 品系的拷贝数或占比。

�� 产品核心参数与组成

项目  详细信息

检测方法  实时荧光定量 PCR (TaqMan 探针法)

检测靶标  转基因水稻品系 LLRICE601 (PAT基因/边界序列)

产品规格  48T (即 50 次测试)

检测限  最低检测限可达 0.1% (部分产品可识别个位拷贝数)

主要组分  引物探针混合液、qPCR 预混液、阳性对照、阴性对照

��️ 操作流程

样本处理：提取待测样本（如水稻叶片、种子、米粉等）的基因组 DNA。

试剂准备：在冰上将引物探针混合液与 qPCR 预混液按比例混合。

加样：将 DNA 模板、阴性对照（无菌水）和阳性对照（试剂盒提供）加入到反应体系中。

qPCR 扩增：将反应板放入荧光定量 PCR 仪（如 ABI 7500、Bio-Rad CFX96 等）中，运行两步法程序：

预变性：95℃ 10 分钟

扩增循环：95℃ 15 秒 → 60℃ 1 分钟 (采集荧光)，40 个循环。

结果分析：仪器自动分析扩增曲线和 Ct 值。

�� 结果判读标准

结果类型  判读标准  解释

阳性 (+)  扩增曲线呈典型“S”型，且 Ct 值 ≤ 36-40。  样品中检测到 LLRICE601 基因片段，判定为含有转基因水稻品系 LLRICE601。

阴性 (-)  无 Ct 值，或 Ct 值 ≥ 阈值，无指数增长期。  样品中未检测到 LLRICE601 基因片段，判定为阴性。

无效  阳性对照未扩增，或阴性对照出现扩增。  实验失败（可能存在试剂污染或失效），结果无效。

⚠️ 注意事项

防止污染：建议在独立的洁净区域进行操作，并使用带滤芯的枪头，避免气溶胶污染。

避光保存：反应液中的荧光染料对光敏感，试剂应 -20℃ 避光 保存。

内源基因对照：建议同时使用 水稻内源基因检测试剂盒（如水稻 Actin 基因）对样本进行检测，以排除假阴性结果。

适用范围：该产品通常仅供科研使用，不得用于临床试验或人体试验。

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实验操作规范

严格分区操作：试剂配制区、样本处理区、扩增区需物理隔离，防止气溶胶污染。

每次实验需设置阴性对照（无模板DNA）、阳性对照（已知PAT基因样本）及空白对照（仅缓冲液）。

加样时避免过量或不足，推荐低容量反应管以提高热传导率。

污染防控

定期监测实验室空气、加样枪及仪器表面污染，可通过擦拭采样后扩增验证。

扩增产物需在专用区域处理，避免开盖时形成气溶胶污染。