CP4-EPSPS基因核酸检测试剂盒（PCR-荧光探针法） 新品

 产品介绍：

该试剂盒的核心检测目标是 CP4-EPSPS 基因（5-烯醇丙酮酰莽草酸-3-磷酸合酶），这是目前全球应用最广泛的抗除草剂（草甘膦）转基因标记基因，常见于抗除草剂大豆（如GTS 40-3-2）、玉米、棉花等作物中。

 与普通的PCR试剂盒不同，荧光探针法（TaqMan Probe） 具有更高的特异性和灵敏度，能够实现精准的定性和定量分析。

�� 检测原理与目的

检测原理：基于实时荧光定量PCR（qPCR）技术。试剂盒中包含一对特异性引物和一条特异性的TaqMan荧光探针。探针两端分别标记有荧光报告基团（如FAM）和荧光淬灭基团。

在PCR扩增过程中，Taq酶的5'→3'外切酶活性会切断与模板结合的探针，使荧光报告基团与淬灭基团分离，从而发出荧光。

荧光信号的累积与扩增产物的数量同步，仪器实时监测荧光信号，并根据Ct值（循环阈值）进行定量或定性分析。

核心目的：

特异性检测：专一性地检测样品中是否存在CP4-EPSPS基因片段。

定量分析：通过建立标准曲线，计算样品中CP4-EPSPS基因的拷贝数或占总基因组的百分比（如0.1%检出限）。

食品安全与合规性检测：用于进出口贸易、食品加工原料筛查等对检测准确性要求极高的场景。

�� 产品核心参数与组成

项目  详细信息

检测方法  实时荧光定量PCR (TaqMan探针法)

检测靶标  CP4-EPSPS 基因 (常用于检测GTS 40-3-2等品系)

产品规格  48T 或 48T (即48/50次测试)

检测限  最低检测限可达 0.1% (部分高灵敏度产品可达个位数拷贝数)

荧光通道  FAM通道 (通常配置淬灭基团如TAMRA或BHQ)

主要组分  2×Probe qPCR MagicMix (预混液)、特异性引物探针混合液、

阳性质控品 (含CP4-EPSPS序列的DNA/质粒)、阴性质控品

��️ 操作流程

该试剂盒的操作流程遵循标准的qPCR流程，通常在2小时内完成：

样本处理：提取待测样本（如大豆粉、玉米叶、饲料等）的基因组DNA。

试剂准备：在冰上将qPCR预混液、引物探针混合液和DNA模板按比例混合。

加样：将混合好的反应液加入PCR板或管中，设置阴性对照（无菌水）和阳性对照（试剂盒提供）。

荧光PCR扩增：将反应体系放入荧光定量PCR仪中，设置反应程序（典型的两步法程序）：

预变性：95℃ 10分钟

扩增循环：95℃ 15秒 → 60℃ 60秒 (采集FAM荧光信号)，40个循环。

结果分析：仪器自动分析扩增曲线和Ct值。

�� 结果判读标准

结果判读主要依据扩增曲线形态和Ct值（具体阈值请以说明书为准）：

结果类型  判读标准  解释

阳性 (+)  扩增曲线呈典型的“S”型，且 Ct值 ≤ 36-40。  样品中检测到CP4-EPSPS基因，判定为转基因阳性。

阴性 (-)  无Ct值，或Ct值 ≥ 阈值，曲线为直线或轻微斜线。  样品中未检测到CP4-EPSPS基因，判定为阴性。

可疑  36 < Ct < 40，且曲线呈微弱“S”型。  建议对该样本进行重复实验或使用其他方法验证。

无效  阳性对照未扩增，或阴性对照出现扩增。  实验失败（可能存在试剂污染或失效），结果无效。

⚠️ 注意事项

防止污染：qPCR灵敏度极高，极易受气溶胶污染影响。建议实验分区操作（试剂准备区、样本制备区、扩增区），并使用带滤芯的枪头。

避光保存：反应液中的荧光探针成分对光敏感，试剂应避光保存，使用前避免长时间暴露在强光下。

内源基因对照：为了确保检测结果的准确性（排除假阴性），建议同时使用植物内源基因检测试剂盒（如大豆Lectin基因、玉米ZSSIIb基因）对样本进行检测，以确认样本DNA提取成功且无PCR抑制物。

标准曲线：若需进行精确定量，需使用试剂盒提供的阳性对照梯度稀释，建立标准曲线。

公司正在出售的产品：

科研领域：

常规PCR试剂盒。

临床诊断：

探针法qPCR试剂盒（如牛白血病病毒，灵敏度100拷贝/反应）。

现场检测：

恒温扩增试剂盒（如LAMP法，90分钟出结果）