大豆内源基因核酸检测试剂盒（恒温荧光法） 新品

产品介绍：

检测原理与核心优势

该试剂盒采用的是恒温荧光检测技术（通常基于LAMP或类似原理）。

核心原理：针对大豆内源基因（如编码豆球蛋白的 Le1 基因或凝集素基因）的特异性保守序列设计多组特异性引物。在恒定温度（通常为60-65℃）下，利用具有链置换活性的DNA聚合酶进行核酸扩增。反应过程中，随着DNA的大量合成，会产生荧光信号（通常通过荧光染料或探针实现）。仪器实时监测荧光信号的变化，从而判断样本中是否含有大豆源性成分。

内参作用：如果内源基因检测为阴性，说明DNA提取失败或样本中不含大豆基因组，此时即使转基因基因检测为阴性，也不能判定为“非转基因”，必须以内参结果为准。

主要优势：

操作简便：无需复杂的热循环，程序简单。

快速高效：通常在45-60分钟内即可完成检测。

高灵敏度：检出限通常可达0.1%（相对于基因组DNA），能够检测出极低含量的大豆成分。

�� 产品性能指标

根据同类产品的性能参数，该试剂盒通常具备以下指标：

指标项目  性能参数参考

检测范围  适用于农作物植株、米粉、面粉、豆制品、米制品、婴幼儿辅食、罐头食品、薯类和膨化食品、植食性饲料等。

最低检测限  检出限 0.1%（相对于基因组DNA）

反应时间  约 45 - 60 分钟

适用仪器  恒温荧光检测仪（如Genie II, ESE Tube Scanner等），部分荧光定量PCR仪（如ABI 7500, CFX96等）

�� 主要组分与储存

试剂盒通常包含以下组分（以48T规格为例）：

反应液A：通常包含反应缓冲液、dNTPs、Mg²⁺等。

反应液B：通常包含酶混合物（Bst DNA聚合酶等）。

显色液/C液：通常包含荧光染料。

阴性对照 (NG)：无模板对照（NTC）。

阳性对照 (PG)：含有大豆内源基因片段的质粒或大豆DNA。

储存条件：所有组分应于 -20℃ 条件下避光保存，运输过程需使用干冰或冰袋。避免反复冻融，使用前需完全解冻并混匀。

�� 标准操作流程

样本处理与DNA提取

采集待检测的植物组织、食品或饲料样本。

使用CTAB法或商品化的DNA提取试剂盒，提取样本的基因组DNA作为模板。

试剂准备

将试剂完全解冻，各组分在使用前需涡旋混匀，并瞬时离心。

计算所需反应管数量（待检样品数 + 阴性对照 + 阳性对照），并按比例配制预混液。

反应体系配置与加样

在冰上操作，将反应液A、B、C按说明书比例混合，分装到PCR管或八联管中。

向反应管中加入提取的DNA模板（或阴性/阳性对照）。

充分混匀，离心去除气泡。

恒温扩增与检测

将反应管放入恒温荧光检测仪中。

设置反应温度（通常为60-63℃）和时间（通常为45-60分钟），并选择荧光通道进行实时监测。

结果判读

阳性：反应曲线呈明显的指数增长，且有清晰的平台期，Ct值通常在30-36个循环内。

阴性：无扩增曲线或Ct值大于设定阈值（如40），曲线为直线或轻微斜线。

⚠️ 注意事项

防止污染：由于灵敏度极高，实验应严格分区（试剂准备区、样本制备区、扩增区），避免气溶胶污染。反应结束后严禁开盖，应直接丢弃入密封袋中处理。

操作规范：试剂配制和加样步骤建议在冰上进行，避免酶活性损失。反应液对光敏感，应避光保存和使用。

质控要求：每次实验必须设置阴性对照（无模板）和阳性对照。若阴性对照出现阳性扩增或阳性对照无扩增，则本次实验结果无效。

公司正在出售的产品：

高特异性

引物设计基于目标基因保守区域，可区分高度同源序列（如病毒变异株）。

高灵敏度

检测限低至10拷贝/反应，适用于微量样本。

高效扩增

热启动酶（如HotStarTaq）减少非特异性扩增，30分钟内完成40个循环。

防污染设计

UNG酶系统降解残留产物，避免交叉污染。

稳定性提升

冻干预混技术实现常温运输，操作便捷。