细胞简介:

大鼠神经干细胞分离自脑皮层组织;大脑分左右两个半球,大脑皮质(灰质)覆盖着每个大脑半球的大部分,它是神经元胞体集中的地方。内部则是由神经纤维或髓鞘构成的白质。每一个半球都有三个面,即外侧面(约占整个皮质面积的1/3)、内侧面和底面(占2/3的面积);半球表面有很多深浅不等的沟或裂,沟或裂之间的隆起叫回,它们大大增加了大脑的表面积;大脑外侧面重要的沟、裂有大脑外侧裂、顶枕裂和中央沟。由于三沟裂之界隔,使大脑皮质组分为额叶、顶叶、颞叶、枕叶四大部分。神经干细胞具有分化为神经神经元、星形胶质细胞和少突胶质细胞的能力,能自我更新,并足以提供大量脑组织细胞的细胞群。神经干细胞是一类具有分裂潜能和自更新能力的母细胞,它可以通过不对等的分裂方式产生神经组织的各类细胞。需要强调的是,在脑脊髓等所有神经组织中,不同的神经干细胞类型产生的子代细胞种类不同,分布也不同。神经干细胞作为干细胞的一种,它具有其它所有干细胞的基本特征:具有自我维持和自我更新能力,具有多种分化潜能,具有分化为本系统大部分类型细胞的能力,这种自我更新和分化潜能可以维持相当长的时间甚至终生,对损伤和疾病具有反应能力。神经干细胞在疾病、损伤状态下具有增殖、迁移,并向神经细胞、星形胶质细胞和少突胶质细胞分化的能力,已成为神经系统损伤修复和再生研究的热点,体外建立稳定的神经干细胞培养模型是其基础和临床应用的前提。神经干细胞在培养3-4d后,可形成神经球,神经球在培养基中呈悬浮生长,予以更换半量培基,1周后用吸管轻柔吹打球形克隆成为小的神经球和单细胞悬液,将部分细胞接种到新的培养瓶中,2×10⁵个细胞/瓶,每7-10d传代1次,每隔3d离心更换半量培养基1次,培养条件不变。
产品名称 | 大鼠神经干细胞 | 产品货号 | P-X1710 |
英文名称 | Rat Neural Stem Cells | 规格 | 5×10^5 |
报告 | 提供免疫荧光鉴定报告 | 组织来源 | 脑组织 |
产品信息:

方法简介:实验室分离的大鼠神经干细胞采用胰蛋白酶消化后差速贴壁,结合神经干细胞专用培养基培养筛选制备而来,总量约为5×10⁵cells/瓶。
质量检测:实验室分离的大鼠神经干细胞经Nestin免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
产品名称:大鼠神经干细胞
组织来源:脑组织
产品规格:5×10⁵Cells/T25培养瓶
培养信息:包被条件
培养基含B-27 Supplement、EGF、bFGF、Penicillin、Streptomycin等
换液频率:每2-3天换液一次
生长特性:悬浮
细胞形态:球形
传代特性:可传2-3代
消化液:Accutase消化液:或0.25%胰蛋白酶大鼠神经干细胞体外培养周期有限;建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的最佳培养状态。
原代细胞培养:

培养基选择:根据细胞类型选择专用培养基,如上皮细胞用上皮细胞培养基、成纤维细胞用成纤维细胞培养基,必要时添加血清(胎牛血清FBS常用,浓度10%-20%)、生长因子、抗生素等补充成分;培养基使用前需预热至37℃。
接种密度控制:原代细胞接种密度不宜过低,否则细胞难以分泌足够的自分泌因子支持生长,一般接种密度为1×10⁵-5×10⁵细胞/cm²;接种后轻轻晃动培养瓶,使细胞均匀分布。
培养环境监控:保持培养箱内37℃、5%CO₂的恒定环境,定期检查培养基颜色变化(变黄说明pH下降,需及时换液);原代细胞贴壁前避免频繁晃动培养瓶,贴壁后通常每2-3天换液一次。
原代细胞分离:

组织样本处理:取材后立即置于预冷的含抗生素的PBS或组织保存液中,避免样本干燥和温度变化;修剪时去除坏死、结缔组织等杂质,尽量减小组织块体积以提高消化效率。
消化方法选择:
酶消化法:根据组织类型选对应酶(如胰蛋白酶用于上皮类组织、胶原酶用于结缔组织丰富的组织),严格控制消化温度(通常37℃)和时间,每隔5-10分钟镜下观察,避免过度消化损伤细胞。
机械分离法:适合柔软组织(如脑、肝脏),通过剪碎、吹打、过滤等方式分散细胞,操作时动作轻柔,减少细胞机械损伤。
细胞过滤与离心:用合适孔径的细胞筛(如100-200目)过滤细胞悬液,去除未消化的组织块;离心转速通常为1000-1500rpm,时间5-10分钟,避免高速离心导致细胞破裂。
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