细胞简介:

大鼠破骨细胞分离自骨组织和骨髓;破骨细胞是骨组织中的多核巨细胞,位于骨组织表面的浅凹处。目前一般认为破骨细胞是分离自骨骼外的造血系统,其前体可能属于造血干细胞的前单核细胞。破骨细胞的主要功能是维持骨吸收和骨形成的相对平衡,若失去这种平衡则发生病理性变化。因此多数学者从破骨细胞着手研究破骨细胞的结构、功能探讨骨吸收,形成相互平衡的机制。但破骨细胞是一种终末分化细胞,属于不增殖细胞群,不能增殖和传代,只能进行原代培养且存活时间较短。
产品名称 | 大鼠破骨细胞 | 产品货号 | P-X1654 |
英文名称 | Rat Osteoclast Cells | 规格 | 5×10^5 |
报告 | 提供免疫荧光鉴定报告 | 组织来源 | 骨髓 |
产品信息:

方法简介:实验室分离的大鼠破骨细胞采用机械分离法/密度梯度离心法和骨髓单核细胞诱导法制备而来,细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。
质量检测:实验室分离的大鼠破骨细胞经TRAP染色检测,纯度可达30%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
产品名称:大鼠破骨细胞
组织来源:骨髓
产品规格:5×10⁵Cells/T25培养瓶
培养信息:包被条件
培养基含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率:每2-3天换液一次
生长特性:贴壁
细胞形态:多核、巨细胞
传代特性:属于终末分化细胞;属于不增殖细胞群
消化液:0.25%胰蛋白酶大鼠破骨细胞体外培养周期有限;建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的最佳培养状态。
操作过程:

组织消化的细节:
分阶段消化:对于致密组织(如肾脏、乳腺),可先剪碎至1mm³左右的小块,用PBS清洗2-3次去除血液和杂质,再进行酶消化,避免杂质影响酶的活性。
间歇振荡消化:消化过程中可将培养瓶置于摇床上,以60-80rpm的速度轻微振荡,促进酶与组织充分接触,提高消化效率。
细胞计数与接种:
计数前混匀:细胞悬液需充分混匀后再取样计数,避免细胞沉降导致计数误差;计数时至少计数2个方格,取平均值提高准确性。
接种后静置:细胞接种后将培养瓶置于培养箱内静置2-4小时,期间不要晃动,让细胞自然贴壁,之后再轻轻更换培养位置。
换液与传代的技巧:
换液留底液:换液时不要完全倒掉旧培养基,可保留10%左右的底液,减少细胞环境的突变,帮助细胞适应新培养基。
传代避免过度消化:原代细胞对胰蛋白酶更敏感,传代时消化时间比传代细胞短2-3分钟,镜下观察到细胞边缘收缩、开始脱落时即可终止消化。
原代细胞实验常见问题:

污染防控:实验全程严格无菌操作,超净工作台使用前紫外消毒30分钟,实验用品需高压灭菌;定期对培养箱、水浴锅等设备进行清洁和消毒,避免细菌、真菌、支原体污染。
细胞老化与分化:原代细胞传代次数有限,通常传至3-5代后会出现老化,需及时冻存早期代次细胞;培养过程中避免过度传代、营养缺乏、环境刺激等因素,防止细胞自发分化。
实验重复性保障:每次实验使用同一来源、同一代次的细胞,严格控制实验条件(如培养基批次、消化时间、培养时间等),设置足够的重复样本,减少实验误差。
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