大鼠胰岛细胞
产品信息：
产品名称 大鼠胰岛细胞
组织来源 胰腺组织
种属 大鼠
产品规格 5×10^5Cells/T25
英文名称 | Rat Pancreatic Islet Cells | 规格 | 5×105 |
细胞形态 | 梭形、多角形 | 货号 | P-X1610 |
培养信息：
方法简介：实验室分离的大鼠胰岛细胞采用胶原酶灌注消化法结合密度梯度离心法制备而来，细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。
质量检测：实验室分离的大鼠胰岛细胞经DTZ染色检测，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
产品名称：大鼠胰岛细胞
组织来源：胰腺组织
产品规格：5×10⁵Cells/T25培养瓶
培养信息：包被条件
培养基含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率:每2-3天换液一次
生长特性：贴壁
细胞形态：梭形、多角形
传代特性：可传1-2代
消化液：0.25%胰蛋白酶大鼠胰岛细胞体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的最佳培养状态。
细胞简介 ：
大鼠胰岛细胞分离自胰腺组织；胰腺分为外分泌腺和内分泌腺两部分。外分泌腺由腺泡和腺管组成，腺泡分泌胰液，腺管是胰液排出的通道。胰液中含有碳酸氢钠、胰蛋白酶原、脂肪酶、淀粉酶等。胰液通过胰腺管排入十二指肠，有消化蛋白质、脂肪和糖的作用。内分泌腺由大小不同的细胞团──胰岛所组成，胰岛主要由4种细胞组成：α细胞、β细胞、γ细胞及PP细胞。α细胞分泌胰高血糖素，升高血糖；β细胞分泌胰岛素，降低血糖；γ细胞分泌生长抑素，以旁分泌的方式抑制α、β细胞的分泌；PP细胞分泌胰多肽，抑制胃肠运动、胰液分泌和胆囊收缩。胰岛细胞作为糖尿病新药的细胞筛选模型需保持其结构完整、生理功能稳定和足够长的存活时间。胰岛占胰腺总质量的1%-2%，每个胰岛大概含有1000个细胞。胰岛移植可消除常规治疗产生的严重低血糖症状，具有创伤小及并发症少等优点，是最有前景的Ⅰ型糖尿病治疗方案。移植胰岛的获得需经过供体筛选、胰腺消化、胰岛分离纯化及结果鉴定等步骤，分离纯化效果取决于原料及操作方法的选择。
原代细胞传代：
传代时机判断
细胞汇合度达到80%-90%时进行传代，避免细胞过度汇合导致接触抑制，影响增殖能力
观察细胞状态：细胞形态正常，无明显漂浮、污染迹象
消化环节控制
消化前准备：吸出旧培养基，用PBS轻轻冲洗细胞1-2次，去除血清（血清会抑制胰蛋白酶活性）
消化液选择：同原代分离，根据细胞类型选择合适的消化酶，胰蛋白酶消化时间一般为1-5分钟，胶原酶消化时间为10-30分钟
消化终止：显微镜下观察到细胞回缩变圆、间隙增大时，立即加入含血清的培养基终止消化，血清浓度不低于10%
细胞吹打：用移液器轻轻吹打细胞，避免过度用力导致细胞破裂，吹打次数一般为10-15次
传代比例控制
传代比例根据细胞生长速度调整：生长速度快的细胞（如成纤维细胞）可按1:3-1:6传代，生长速度慢的细胞（如内皮细胞、神经细胞）按1:2传代
首次传代比例可适当提高（如1:2），待细胞适应体外培养环境后再调整为常规比例
传代后培养
接种后轻轻晃动培养瓶，使细胞均匀分布，放入培养箱中培养
24小时内不要晃动培养瓶，避免细胞贴壁不牢
培养24-48小时后观察细胞贴壁情况，更换新鲜培养基，去除未贴壁的死细胞和细胞碎片
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收货与处理流程：
1. 收货检查
收到细胞后首先观察T25培养瓶瓶身是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象，若有异常及时联系。
2. 细胞复苏（仅针对冻存细胞）
将冻存管迅速放入37℃温水中摇晃融化，时间约1分钟
加入4-5ml完全培养基混匀，1000RPM常温离心4-5分钟
弃去上清液，补加1-2ml培养液吹匀，移入含5ml培养基的培养瓶中培养过夜，第二天换液并检查细胞密度
3. 新鲜细胞处理
用75%酒精消毒培养瓶瓶身，拆下封口膜
放入37℃、5%CO₂、饱和湿度的培养箱中静置3-4小时，稳定细胞状态后再进行后续操作
