pCaMV35S基因核酸检测试剂盒（恒温荧光法） 新品

产品介绍：

检测原理与目的

检测原理：试剂盒利用针对CaMV 35S基因设计的特异性引物，在恒温条件下（通常为63℃）对目标核酸进行扩增。反应体系中包含荧光染料，扩增过程中产生的焦磷酸镁沉淀会与荧光染料结合，发出荧光信号。仪器实时监测荧光信号的变化，并根据预设的阈值自动判读结果（阳性或阴性）。

核心目的：用于食品、饲料、农作物植株等样品中转基因成分的初筛和定性检测。CaMV 35S启动子是转基因植物中使用最广泛的启动子之一，检测出该序列通常意味着样品含有转基因成分。

�� 产品核心参数与组成

项目  详细信息

检测方法  恒温荧光法 (LAMP)

检测靶标  花椰菜花叶病毒35S启动子 (CaMV 35S)

产品规格  48T (即48次测试)

检出限  通常为 0.1% (即能检测出样品中含量低至0.1%的转基因成分)

主要组分  A液 (反应液)、B液 (酶混合液)、C液 (显色液/荧光染料)、

阴性对照 (NG)、阳性对照 (PG)

��️ 操作流程

该试剂盒的操作流程相对简化，主要分为以下几个步骤：

样品处理：提取待测样品的基因组DNA（通常使用配套的植物基因组DNA提取试剂盒）。

试剂准备：在冰盒上将A液、B液、C液按比例混合，涡旋混匀后离心备用。

加样：将提取的DNA模板、阴性对照、阳性对照分别加入到分装好的反应管中。

恒温扩增：将反应管放入恒温荧光检测仪中，在 63℃ 条件下反应 60分钟。

结果判读：仪器自动根据荧光曲线和阈值线判断结果（阳性或阴性）。

�� 结果判读标准

恒温荧光法的结果判读主要依据荧光扩增曲线：

结果类型  判读标准 (仪器自动判读)  解释

阳性 (+)  荧光扩增曲线呈典型的“S”型，且Ct值 ≤ 阈值 (通常为36或40)。  样品中检测到CaMV 35S基因片段，判定为转基因阳性。

阴性 (-)  无Ct值，或Ct值 ≥ 阈值，曲线为直线或轻微斜线，无“S”型扩增曲线。  样品中未检测到CaMV 35S基因片段，判定为阴性。

无效  阳性对照未出现“S”型曲线，或阴性对照出现扩增曲线。  试验结果无效，需排查污染或试剂失效问题后重新检测。

⚠️ 注意事项

防止污染：由于灵敏度极高，建议实验分区操作（试剂准备区、样本制备区、扩增区），避免气溶胶污染导致假阳性。

避光保存：反应液中的荧光染料对光敏感，试剂应避光保存，使用前避免长时间暴露在强光下。

仪器兼容性：适用于Dhelix、Genie II、ESE Tube Scanner等恒温荧光检测仪，部分荧光定量PCR仪（如ABI 7500）也可通过调整程序使用。

对照设置：每次检测必须包含阴性对照（无菌水）和阳性对照（含35S序列的质粒或阳性DNA），以确保试验有效性。

核心优势与技术要点：

高特异性

引物设计基于目标基因保守区域，可区分高度同源序列（如病毒变异株）。

高灵敏度

检测限低至10拷贝/反应，适用于微量样本。

高效扩增

热启动酶（如HotStarTaq）减少非特异性扩增，30分钟内完成40个循环。

防污染设计

UNG酶系统降解残留产物，避免交叉污染。

稳定性提升

冻干预混技术实现常温运输，操作便捷。

公司正在出售的产品：

防污染操作

需在试剂准备区、样本处理区、扩增区独立操作，使用带滤芯吸头及专用实验服。

阳性对照管理

浓度高达1×10⁸拷贝/μL，需单独存放并避免污染其他试剂。

局限性

仅限科研使用，不可用于临床诊断；

环境样本中可能存在PCR抑制剂，需设置内参对照。