大鼠海绵体平滑肌细胞 新品

细胞简介：

大鼠海绵体平滑肌细胞分离自海绵体组织；海绵体，又称海绵体肌，是最硬的平滑肌和结缔组织。海绵体是一种勃起组织，外面包有坚厚的白膜，内部由结缔组织和平滑肌组成海绵状支架，其腔隙与血管相通。它主要包括海绵体内皮细胞、平滑肌细胞和成纤维细胞3种细胞成分。其中平滑肌细胞和成纤维细胞镶嵌于海绵体细胞外基质的胶原中，在消化海绵体组织时，胶原酶的作用主要是松解海绵体内皮细胞与基膜的联系，破坏海绵体内皮细胞间的紧密连接。因此可用胶原酶分离出海绵体平滑肌细胞。平滑肌，是非横纹肌的肌肉组织。分布在人体动脉和静脉血管壁、膀胱、子宫、男性和女性生殖道、消化道、呼吸道、眼睛的睫状肌和虹膜。平滑肌细胞原代分离培养3天后，可见细胞贴壁伸展，细胞形态：大小不一，呈梭形、不规则形、三角形或扇形，核卵圆形、居中；2周后细胞汇合，多数细胞伸展呈长梭形，胞浆丰富，有分枝状突起，细胞平行排列成单层或部分区域多层重叠生长，高低起伏；细胞密度低时，常交织成网状；密度高时，则排列为旋涡状或栅栏状。传代后细胞生长较快，4-6天即可汇合，并保持上述形态学特征和生长特点。

产品信息：

方法简介：实验室分离的大鼠海绵体平滑肌细胞采用胶原酶消化法结合差速贴壁法制备而来，细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。

质量检测：实验室分离的大鼠海绵体平滑肌细胞经α-SMA免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

产品名称：大鼠海绵体平滑肌细胞

英文简称：CCSMCs

组织来源：海绵体组织

产品规格：5×10⁵Cells/T25培养瓶

培养信息：包被条件

培养基含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率:每2-3天换液一次

生长特性：贴壁

细胞形态：成纤维细胞样

传代特性：可传3-5代左右；3代以内状态最佳

消化液：0.25%胰蛋白酶大鼠海绵体平滑肌细胞体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的最佳培养状态。
原代细胞接种：

细胞计数与密度调整

使用血球计数板或细胞计数仪准确计数，调整细胞密度至合适范围（不同细胞类型差异较大，一般为1×10⁵-1×10⁶cells/ml）

密度过低：细胞无法分泌足够的生长因子，难以存活；密度过高：细胞竞争营养物质，易出现接触抑制

培养基选择

优先使用原代细胞专用培养基，若使用通用培养基，需添加合适的生长因子、血清等补充成分（如成纤维细胞添加FGF，内皮细胞添加VEGF）

血清浓度：原代细胞培养血清浓度一般为10%-20%，部分特殊细胞（如神经细胞）需使用无血清培养基

培养环境控制

温度：哺乳动物细胞一般为37℃，鸟类细胞38.5℃，昆虫细胞27℃

CO₂浓度：大多数细胞需要5%CO₂，维持培养基pH在7.2-7.4之间

湿度：培养箱湿度保持在70%-80%，避免培养基蒸发过快
原代细胞实验注意事项：

取材要快、要新鲜、全程无菌

组织离体时间越短越好，冰上操作，减少缺血损伤。

严格控制细胞代数

原代细胞只建议用 P0～P3，代数越高越容易分化、结果越不可靠。

接种密度宁高不低

原代细胞普遍怕稀，太稀不贴壁、不生长、容易凋亡。

消化是关键，宁轻勿重

胰酶 / 胶原酶只消化到细胞变圆就终止，过度消化必死一批。

吹打轻柔，避免机械损伤。

培养基和血清不要随便换批次

血清、基础培养基、添加因子固定厂家固定批次，换批次必须先预实验。

避免频繁折腾细胞

少开培养箱门，不反复观察、不反复拿进拿出，温度、pH 波动对原代杀伤极大。

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