植物5-甲基四氢叶酸(5-MTHF)ELISA试剂盒

植物5-甲基四氢叶酸(5-MTHF)ELISA试剂盒 

货号:LM8K975O

规格:48T/96T

检测范围：2.5 ng/L -85 ng/L

使用目的：本试剂盒用于测定植物相关液体样本中 5-甲基 四氢叶酸(5-MTHF)的含量。

实验原理：联迈生物生产的 ELISA 试剂盒采用“夹心法”:将捕获抗体包被于酶标板上，捕获样品及标准 品中的靶蛋白，生物素化的检测抗体与靶蛋白结合， SABC 复合物与生物素化检测抗体结合， 形成免疫复合物，加入 TMB 显色液后，若反应孔中有靶蛋白则显蓝色，加入终止液变黄色， 检测过程中游离的成分均被洗去，用酶标仪在 450 nm 处测 OD 值，靶蛋白浓度与 OD 值之间呈 正比，通过绘制标准曲线计算出标本中靶蛋白的浓度。

试剂盒组成

标本要求 

1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献 进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上 进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避 免反复冻融 

2．不能检测含 NaN3 的样品，因 NaN3 抑制辣根 过氧化物酶的（HRP）活性。

操作步骤：

1. 标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支， 用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。

2. 加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶 标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、待测样 品孔。在酶标包被板上标准品准确加样 50μl， 待测样品孔中先加样品稀释液 40μl，然后再加 待测样品 10μl（样品最终稀释度为 5 倍）。加 样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁， 轻轻晃动混匀。 

3. 温育：用封板膜封板后置 37℃温育 30 分钟。 

4. 配液：将 30 倍浓缩洗涤液用蒸馏水 30 倍稀释后 备用 

5. 洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔 加满洗涤液，静置 30 秒后弃去，如此重复 5 次，拍干。 

6. 加酶：每孔加入酶标试剂 50μl，空白孔除外。 

7. 温育：操作同 3。 

8. 洗涤：操作同 5。 

9. 显色：每孔先加入显色剂 A50μl，再加入显色剂 B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色 10 分钟. 

10. 终止：每孔加终止液 50μl，终止反应（此时蓝 色立转黄色）。 

11. 测定：以空白孔调零，450nm 波长依序测量各孔 的吸光度（OD 值）。 测定应在加终止液后 15 分钟以内进行。

计算

以标准物的浓度为横坐标，OD 值为纵坐标，在坐 标纸上绘出标准曲线，根据样品的 OD 值由标准曲线 查出相应的浓度；再乘以稀释倍数；或用标准物的浓 度与 OD 值计算出标准曲线的直线回归方程式，将样 品的 OD 值代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀 释倍数，即为样品的实际浓度。 

注意事项 

1．试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡 15-30 分 钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板 条应装入密封袋中保存。 

2．浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中 加温助溶，洗涤时不影响结果。 

3．各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性， 以避免试验误差。一次加样时间最好控制在 5 分 钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。 

4．请每次测定的同时做标准曲线，最好做复孔。如 标本中待测物质含量过高（样本 OD 值大于标准品 孔第一孔的 OD 值），请先用样品稀释液稀释一定 倍数（n 倍）后再测定，计算时请最后乘以总稀 释倍数（×n×5）。 

5．封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。 

6．底物请避光保存。 

7．严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须 以酶标仪读数为准. 

8．所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。 

9．本试剂不同批号组分不得混用。 

保存条件及有效期 

1．试剂盒保存：；2-8℃。 

2．有效期：6 个月

本产品只适用于科研，不能用于临床诊断。严禁用于临床医疗及其他非科研用途！

以实际收货产品说明书为准，网站说明书仅供参考。