植物类黄酮测试盒 新品

商品属性

测定意义与原理

测定意义

类黄酮（Flavonoids）是植物重要的次生代谢产物，具有广泛的生物学功能和医疗保健价值：植物生理功能：参与植物生长发育，调节激素平衡，增强植物抗逆性抗氧化作用：清除体内自由基，预防氧化损伤，延缓衰老抗炎抗菌：抑制炎症反应，增强免疫功能，预防感染降血脂：调节血脂代谢，降低胆固醇，预防心血管疾病抗肿瘤：抑制癌细胞生长，诱导细胞凋亡，预防癌症发生

测定原理

采用比色法，在碱性亚硝酸盐溶液中，类黄酮与铝离子形成红色络合物，该络合物在470nm处有最大吸收峰，吸光度与类黄酮浓度成正比： 类黄酮+NaNO2+Al(NO3)3→碱性条件红色络合物(470nm)类黄酮+NaNO2+Al(NO3)3碱性条件红色络合物(470nm)

试剂盒组成

组分 规格 作用说明

试剂A 液体5mL×1瓶 含5% NaNO₂溶液，提供碱性环境并与类黄酮反应

试剂B 液体4mL×1瓶 含10% Al(NO₃)₃溶液，与类黄酮形成红色络合物

试剂C 液体30mL×1瓶 含4% NaOH溶液，调节反应pH值

标准品 粉剂×1支 含10mg芦丁标准品，用于建立标准曲线

标准品稀释液 液体20mL×1瓶 含60%乙醇，用于稀释标准品

自备仪器与试剂

必备仪器

可见分光光度计/酶标仪（470nm检测通道）

台式高速离心机（≥12000g）

可调式移液器（0.5-10μL、10-100μL、100-1000μL）

恒温水浴锅（控温精度±0.5℃）

研钵/组织匀浆器

必备耗材

1mL玻璃比色皿/96孔板

离心管（1.5mL、10mL）

一次性无菌吸头

容量瓶（100mL）

自备试剂

60%乙醇溶液（作为提取液）

蒸馏水/去离子水

样本前处理方法

新鲜植物组织样本取新鲜植物组织，用蒸馏水冲洗干净，滤纸吸干水分称取约0.1g组织，加入1mL 60%乙醇，冰浴匀浆60℃超声提取30min，功率300W12000rpm 25℃离心10min，取上清液置冰上待测若类黄酮含量过高，可用60%乙醇稀释1-5倍后测定

干燥植物样本将样本烘干至恒重，粉碎后过40目筛称取约0.02g粉末，加入2mL 60%乙醇60℃振荡提取2h，10000rpm 25℃离心10min取上清液置冰上待测，若类黄酮含量过高，可用60%乙醇稀释1-5倍后测定

果实/蔬菜样本取新鲜果实/蔬菜，去皮去核，切成小块称取约0.5g样本，加入5mL 60%乙醇，冰浴匀浆60℃超声提取30min，12000rpm 25℃离心10min取上清液置冰上待测，若类黄酮含量过高，可用60%乙醇稀释1-5倍后测定

测定操作步骤

标准曲线建立标准品配制：将10mg芦丁标准品加入1mL标准品稀释液，配制成10mg/mL标准液梯度稀释：将10mg/mL标准液用60%乙醇稀释成0.02、0.039、0.078、0.156、0.3125、0.625、1.25、1.5mg/mL的标准系列显色反应：取比色管，加入标准品溶液0.2mL + 试剂A 0.05mL，涡旋混匀，室温静置5min加入试剂B：向各管加入试剂B 0.05mL，涡旋混匀，室温静置5min加入试剂C：向各管加入试剂C 0.4mL，用蒸馏水定容至2mL吸光度测定：在470nm波长下测定各管吸光度，以类黄酮浓度为横坐标，吸光度为纵坐标绘制标准曲线

样本测定样本处理：取0.2mL样本提取液，加入试剂A 0.05mL，涡旋混匀，室温静置5min加入试剂B：向各管加入试剂B 0.05mL，涡旋混匀，室温静置5min加入试剂C：向各管加入试剂C 0.4mL，用蒸馏水定容至2mL空白对照：取0.2mL 60%乙醇，按上述步骤操作，作为空白管吸光度测定：在470nm波长下测定样本管和空白管的吸光度（A样、A空）

结果计算方法

单位定义

mg/g鲜重：每克植物组织鲜重中类黄酮的含量

mg/g干重：每克植物组织干重中类黄酮的含量

mg/mL：每毫升样本中类黄酮的含量

计算公式

类黄酮含量(mg/g鲜重)=(A样−A空)×C标×V总(A标−A空标)×W类黄酮含量(mg/g鲜重)=(A标−A空标)×W(A样−A空)×C标×V总

A样-A空：样本扣除空白后的吸光度值

C标：标准品浓度（mg/mL）

V总：样本提取液总体积（mL）

A标-A空标：标准品扣除空白后的吸光度值

W：样本质量（g）

简化公式

按鲜重计算：类黄酮（mg/g鲜重）= (A样-A空)÷(A标-A空标)×C标×V总÷W

按干重计算：类黄酮（mg/g干重）= (A样-A空)÷(A标-A空标)×C标×V总÷W

性能指标

指标 要求

线性范围 0.0097-1.75mg/mL，线性相关系数r≥0.995

最低检测限 ≤0.00666mg/mL

回收率 90%~110%

批内精密度 CV≤5.0%

批间精密度 CV≤8.0%

稳定性 2-8℃保存12个月，活性保留≥90%

注意事项

样本处理：

样本需新鲜制备，避免类黄酮降解；-80℃可保存1个月

提取过程需避光，避免类黄酮氧化

若样本吸光度不在测量范围内，建议稀释或增加样本量进行检测

试剂使用：

标准品需现配现用，2-8℃可保存四周

显色剂对光敏感，配制后需避光保存

不同批号试剂不能混用，需重新绘制标准曲线

测定过程：

显色完成后需立即测定，2小时后吸光度值会下降

反应时间需严格控制在5min，确保显色充分

每个样本需设置至少3个平行实验，结果取平均值

质量控制：

每次实验需设置空白对照和质控样本

定期校准仪器，确保检测结果准确性

若结果偏差较大，需检查试剂是否变质或样本处理是否正确

公司正在出售的产品