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NAD激酶（NADK）测试盒 新品

NAD Kinase (NADK) Assay Kit
￥1100 100管 起订
￥600 50管 起订
上海 更新日期：2026-03-04

上海博湖生物科技有限公司

VIP1年
联系人：博湖生物
电话：57763112拨打
手机：18930344717 拨打
邮箱：3004987436@qq.com

产品详情:

中文名称：
NAD激酶（NADK）测试盒
英文名称：
NAD Kinase (NADK) Assay Kit
品牌：
博湖
产地：
国产
保存条件：
-20℃保存
纯度规格：
98
产品类别：
生化检测试剂盒 辅酶Ⅱ系列
检测方法：
微量法、可见分光光度法
种属反应性：
说明书
检测类型：
生化检测试剂盒

商品属性

16.png

产品名称

NAD激酶（NADK）测试盒

产品货号

BH-961116

规格

100管/48样、50管/24样

产品分类

辅酶Ⅱ系列

测试方法

微量法、可见分光光度法

用途

仅供科研实验

测定意义与原理

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测定意义

NAD激酶（NADK，EC2.7.1.23）是调控细胞内NAD+与NADP+稳态的关键酶，核心功能包括：能量代谢：催化NAD+磷酸化生成NADP+，为细胞提供还原力（NADPH）氧化还原平衡：NADPH作为谷胱甘肽还原酶、硫氧还蛋白还原酶的辅酶，维持细胞抗氧化系统稳定信号转导：参与细胞内钙信号、ROS信号的调控疾病关联：NADK活性异常与癌症、神经退行性疾病、代谢综合征等疾病密切相关

测定原理

采用偶联酶法检测NADK活性，反应式如下： ATP+NAD+→NADKADP+NADP+ATP+NAD+NADKADP+NADP+ 葡萄糖-6-磷酸+NADP+→G6PDH6-磷酸葡萄糖酸+NADPH+H+葡萄糖-6-磷酸+NADP+G6PDH6-磷酸葡萄糖酸+NADPH+H+ NADPH在340nm处有特征吸收峰，通过监测吸光度上升速率计算NADK活性。

自备仪器与试剂

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必备仪器

紫外分光光度计/酶标仪（340nm检测通道）

台式高速离心机（≥12000g）

恒温水浴锅（控温精度±0.5℃）

可调式移液器（0.5-10μL、10-100μL、100-1000μL）

超声破碎仪（用于细胞/细菌样本）

必备耗材

1mL石英比色皿/96孔紫外板

离心管（1.5mL、10mL）

一次性无菌吸头

研钵/组织匀浆器（冰浴专用）

自备试剂

蒸馏水/去离子水

生理盐水（0.85% NaCl）

液氮（用于样本速冻）

样本前处理方法

动植物组织样本取新鲜组织，用生理盐水冲洗干净，滤纸吸干水分称取0.1g组织，加入1mL预冷提取液，冰浴匀浆12000g 4℃离心15min，取上清液置冰上待测若酶活性过高，可用提取液稀释1-5倍后测定

血清/血浆样本血清样本：血液凝固后3000g 4℃离心10min，取血清上清血浆样本：加入抗凝剂（肝素/EDTA）后3000g 4℃离心10min，取上清样本可直接检测，无需提取处理；活性过高时可用生理盐水稀释

细胞/细菌样本收集对数生长期细胞/细菌，8000g 4℃离心5min弃上清加入1mL预冷提取液重悬，冰浴超声破碎（功率20%，超声3s/间隔10s，重复30次）12000g 4℃离心10min，取上清液置冰上待测

测定操作步骤

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紫外分光光度法操作

试剂准备：

冻干粉试剂：临用前按说明书加入蒸馏水溶解

工作液A：混合NAD+溶液、ATP溶液、MgCl₂溶液，现配现用

工作液B：G6PDH酶液，用缓冲液稀释至1U/mL

预温育：

取比色皿，依次加入：提取液800μL + 工作液A100μL + 样本50μL

37℃预温育5min，记录340nm处初始吸光度A0

反应启动：

加入工作液B50μL立即混匀，开始计时

分别记录1min（A1）、2min（A2）时的吸光度值

计算ΔA：ΔA = (A2 - A1)

微量法（酶标仪）操作96孔板每孔加入：提取液80μL + 工作液A10μL + 样本5μL37℃预温育5min，加入工作液B5μL立即混匀设置动力学模式，340nm处连续读取10个循环（每1min读取1次）计算吸光度增加速率（ΔA/min）

酶活力计算方法

单位定义

U/g鲜重：每g组织鲜重每分钟生成1μmol NADPH的酶量

U/mL：每mL样本每分钟生成1μmol NADPH的酶量

U/mgprot：每mg蛋白每分钟生成1μmol NADPH的酶量

计算公式

NADK活性(U/mgprot)=ΔA×V反总×V样总ε×d×Cpr×V样测×TNADK活性(U/mgprot)=ε×d×Cpr×V样测×TΔA×V反总×V样总

ΔA：1min内吸光度变化值

V反总：反应体系总体积（1.0mL）

V样总：样本提取液总体积（mL）

ε：NADPH摩尔消光系数（6.22×10³ L/(mol·cm)）

d：比色皿光径（1cm）

Cpr：样本蛋白浓度（mg/mL）

V样测：测定时加入样本体积（0.05mL）

T：反应时间（1min）

简化公式

组织样本：NADK（U/g鲜重）= 3.22 × ΔA ÷ W

血清样本：NADK（U/mL）= 3.22 × ΔA

蛋白样本：NADK（U/mgprot）= 3.22 × ΔA ÷ Cpr

注意事项

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样本处理：

样本需新鲜制备，避免酶失活；-80℃可保存1个月

匀浆与超声破碎需在冰浴中进行，控制温度在0-4℃

避免样本接触金属离子，可用EDTA螯合

试剂使用：

G6PDH酶液需现配现用，-20℃分装保存可稳定1个月

NAD+溶液对光敏感，需避光保存

不同批号试剂不能混用，需重新绘制标准曲线

测定过程：

反应温度严格控制在37℃（最适温度）

若ΔA值大于0.3，需稀释样本后重新测定

每个样本需设置3个平行孔，取平均值计算

质量控制：

每次实验设置空白对照（提取液替代样本）和阳性对照（已知活性NADK酶）

若结果偏差较大，需检查试剂是否变质、样本处理是否正确

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NAD激酶;NADK;测试盒;

公司简介

派瑞曼pyram?是上海博湖生物科技有限公司（Shanghai Bohu Biological Technology Co., Ltd.，China）的产品品牌。 派瑞曼pyram?是一家化学、生化和材料科学等领域的科研用研发产品的制造商和供应商,我们的产品在相当宽的基础科学领域得到广泛的应用。 客户包括学术界、工业界和政府的研究和开发实验室以及制药、生物技术、化工/石化行业等具商业规模的企业。 派瑞曼pyram?除包括化学、分析化学、生命科学、材料科学和病理科学产品。质量是所有产品和服务最关键的组成部分,我们通过质量和实力赢得客户的信赖。产品的质量是企业的生命。 公司秉承"专注品质、诚信为本、服务至上、合作共赢"的企业文化积极参与生物领域的技术创新和技术服务,力求为我国科研事业更好的,更专业的服务！

成立日期 (13年)
注册资本 50.000000万人民币
员工人数 10-50人
年营业额 ￥ 300万-500万
经营模式 贸易
主营行业 生物化工,细胞培养,分子生物学,细胞生物学

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