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乙醇脱氢酶(ADH)测试盒 新品

Alcohol Dehydrogenase (ADH) Assay Kit
550 100管 起订
280 50管 起订
上海 更新日期:2026-03-06

上海博湖生物科技有限公司

VIP1年
联系人:博湖生物
电话:57763112拨打
手机:18930344717 拨打
邮箱:3004987436@qq.com

产品详情:

中文名称:
乙醇脱氢酶(ADH)测试盒
英文名称:
Alcohol Dehydrogenase (ADH) Assay Kit
品牌:
博湖
产地:
国产
保存条件:
-20℃保存
纯度规格:
98
产品类别:
生化检测试剂盒 辅酶Ⅰ系列
检测方法:
微量法、紫外分光光度法
种属反应性:
说明书
检测类型:
生化检测试剂盒

商品属性

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产品名称

乙醇脱氢酶(ADH)测试盒

产品货号

BH-961111

规格

100管/96样、50管/48样

产品分类

辅酶Ⅰ系列

测试方法

微量法、紫外分光光度法

用途

仅供科研实验

测定意义与原理

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测定意义

乙醇脱氢酶(ADH,EC1.1.1.1)是氧化还原酶家族成员,核心功能包括:酒精代谢:催化乙醇氧化为乙醛,是人体酒精解毒的关键酶能量代谢:参与NADH/NAD+平衡调节,维持细胞氧化还原稳态工业应用:用于酿酒、生物燃料生产、食品发酵等领域的工艺优化临床价值:血清ADH活性异常与肝脏疾病、酒精中毒、肿瘤等密切相关

测定原理

ADH催化乙醇氧化为乙醛,同时将NAD+还原为NADH,通过监测340nm处吸光度的上升速率计算酶活性: 乙醇+NAD+→ADH乙醛+NADH+H+乙醇+NAD+ADH乙醛+NADH+H+ NADH在340nm处有特征吸收峰,吸光度每分钟增加量与ADH活性成正比。

自备仪器与试剂

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必备仪器

紫外分光光度计/酶标仪(340nm检测通道)

台式高速离心机(≥12000g)

恒温水浴锅(控温精度±0.5℃)

可调式移液器(0.5-10μL、10-100μL、100-1000μL)

超声破碎仪(用于细胞/酵母样本)

必备耗材

1mL石英比色皿(光径1cm)/96孔紫外板

离心管(1.5mL、10mL)

一次性无菌吸头

研钵/组织匀浆器(冰浴专用)

自备试剂

蒸馏水/去离子水

生理盐水(0.85% NaCl)

无水乙醇(分析纯)

样本前处理方法

组织样本取新鲜组织(如肝脏),用生理盐水冲洗干净,滤纸吸干水分称取0.1g组织,加入1mL预冷提取液,冰浴匀浆12000g 4℃离心15min,取上清液置冰上待测若酶活性过高,可用提取液稀释1-5倍后测定

血清/血浆样本血液凝固后3000g 4℃离心10min,取血清上清血浆样本需加入抗凝剂(肝素/EDTA)后离心分离样本可直接检测,无需提取处理;活性过高时可用生理盐水稀释

细胞/酵母样本收集对数生长期细胞/酵母,8000g 4℃离心5min弃上清加入1mL预冷提取液重悬,冰浴超声破碎(功率20%,超声3s/间隔10s,重复30次)12000g 4℃离心10min,取上清液置冰上待测

测定操作步骤

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紫外分光光度法操作

试剂准备:

试剂一(提取液):直接使用

试剂二(NAD+溶液):使用前用蒸馏水稀释10倍

试剂三(乙醇溶液):用蒸馏水配制成0.1mol/L浓度

空白管设置:

比色皿中加入:提取液950μL + 稀释后NAD+溶液30μL + 蒸馏水20μL

37℃预温育5min,记录340nm处初始吸光度A0

样本测定:

另取比色皿,加入:提取液950μL + 稀释后NAD+溶液30μL + 样本20μL

37℃预温育5min,加入乙醇溶液20μL立即混匀

分别记录0min(A1)、1min(A2)、2min(A3)时的吸光度

计算ΔA:ΔA = [(A2 - A1) + (A3 - A2)] / 2

微量法(酶标仪)操作96孔板每孔加入:提取液95μL + 稀释后NAD+溶液3μL + 样本2μL37℃预温育5min,加入乙醇溶液2μL立即混匀设置动力学模式,340nm处连续读取10个循环(每6s读取1次)计算吸光度上升速率(ΔA/min)

酶活力计算方法

单位定义

U/g鲜重:每g组织鲜重每分钟催化生成1μmol NADH的酶量

U/mL:每mL样本每分钟催化生成1μmol NADH的酶量

U/mgprot:每mg蛋白每分钟催化生成1μmol NADH的酶量

计算公式

ADH活性(U/g鲜重)=ΔA×V反总×V样总ε×d×W×T×V样测ADH活性(U/g鲜重)=ε×d×W×T×V样测ΔA×V反总×V样总

ΔA:1min内吸光度变化值

V反总:反应体系总体积(1.0mL)

V样总:样本提取液总体积(mL)

ε:NADH摩尔消光系数(6.22×10³ L/(mol·cm))

d:比色皿光径(1cm)

W:组织鲜重(g)

T:反应时间(1min)

V样测:测定时加入样本体积(0.02mL)

简化公式

组织样本:ADH(U/g鲜重)= 80.4 × ΔA ÷ W

血清样本:ADH(U/mL)= 80.4 × ΔA

蛋白样本:ADH(U/mgprot)= 80.4 × ΔA ÷ Cpr (Cpr为蛋白浓度,mg/mL)

注意事项

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样本处理:

样本需新鲜制备,避免酶失活;-80℃可保存1个月

匀浆与超声破碎需在冰浴中进行,控制温度在0-4℃

肝脏组织样本需去除血液,避免血红蛋白干扰

试剂使用:

NAD+溶液对光敏感,需避光保存

乙醇溶液需现配现用,避免挥发

试剂配制后需检查pH值(8.8±0.2)

测定过程:

反应温度严格控制在37℃(哺乳动物样本)或25℃(植物样本)

ΔA值大于0.4,需稀释样本后重新测定

每个样本需设置3个平行孔,取平均值计算

质量控制:

每次实验设置空白对照(提取液替代样本)和阳性对照(已知活性ADH酶)

若结果偏差较大,需检查试剂是否变质、样本处理是否正确

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乙醇脱氢酶;ADH;测试盒;

公司简介

派瑞曼pyram?是上海博湖生物科技有限公司(Shanghai Bohu Biological Technology Co., Ltd.,China)的产品品牌。 派瑞曼pyram?是一家化学、生化和材料科学等领域的科研用研发产品的制造商和供应商,我们的产品在相当宽的基础科学领域得到广泛的应用。 客户包括学术界、工业界和政府的研究和开发实验室以及制药、生物技术、化工/石化行业等具商业规模的企业。 派瑞曼pyram?除包括化学、分析化学、生命科学、材料科学和病理科学产品。质量是所有产品和服务最关键的组成部分,我们通过质量和实力赢得客户的信赖。产品的质量是企业的生命。 公司秉承"专注品质、诚信为本、服务至上、合作共赢"的企业文化积极参与生物领域的技术创新和技术服务,力求为我国科研事业更好的,更专业的服务!

成立日期 (13年)
注册资本 50.000000万人民币
员工人数 10-50人
年营业额 ¥ 300万-500万
经营模式 贸易
主营行业 生物化工,细胞培养,分子生物学,细胞生物学

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