赤羽病病毒（AKAV)核酸检测试剂盒（荧光PCR法） 新品

产品介绍：

这是一种用于检测赤羽病病毒（Akabane virus, AKAV）的高灵敏度分子诊断试剂，广泛应用于牛、羊等反刍动物的先天性畸形病因排查及媒介昆虫监测。

1. 核心用途与背景 ��

针对疾病：赤羽病（Akabane disease），又称阿卡斑病。这是一种由蚊虫传播的虫媒病毒病，主要感染牛、羊等反刍动物。

致病特点：成年动物感染后通常症状轻微或呈隐性感染，但若怀孕母畜（特别是牛、羊）在胎儿发育关键期感染，病毒可通过胎盘感染胎儿，导致流产、死胎、关节弯曲（Arthrogryposis）及脑积水（Hydrocephalus）等严重先天性畸形。

检测靶标：试剂盒通常针对AKAV基因组中S片段（Small segment）的保守序列设计特异性引物和TaqMan探针。

适用样本：适用于流产胎儿组织（脑、脊髓、脾脏）、全血、血清及媒介昆虫（如库蠓）样本。

2. 检测原理与技术 ��

技术方法：实时荧光定量RT-PCR法（TaqMan探针法）。

原理：由于AKAV是分节段的单股负链RNA病毒，试剂盒采用一步法RT-PCR。反应体系中包含逆转录酶和Taq酶，先将病毒RNA逆转录为cDNA，再进行PCR扩增。

双重检测：部分高端试剂盒采用双重荧光PCR技术，同时检测：

FAM通道：检测AKAV的S基因片段（特异性靶标）。

HEX/VIC通道：检测内源性内标（如管家基因GAPDH），用于监测试剂盒有效性及样本提取过程是否受抑制（防止假阴性）。

3. 主要性能参数 ��

性能指标  参数详情  备注

检测限  1×10³ 拷贝/mL  灵敏度高，可检出微量感染

检测范围  2×10³ ~ 1×10⁸ 拷贝/mL  覆盖广，定量准确

特异性  100%  不与蓝舌病毒、茨城病毒等其他相似反刍动物病原体交叉反应

包装规格  50T/盒  也有25T规格

储存条件  -20℃  避光保存，避免反复冻融

有效期  12个月  具体以产品说明书为准

4. 结果判读标准 ��

阳性（+）：

FAM荧光通道出现典型的S型扩增曲线。

Ct值 ≤ 35（部分厂家标准为38或40）。

结论：样本中检出赤羽病病毒核酸。

阴性（-）：

FAM通道无Ct值，或Ct值 > 38，且无指数增长期。

无效实验：

阳性对照未扩增（Ct值 > 35）。

阴性对照出现扩增曲线。

内标未扩增（提示样本存在抑制物或提取失败）。

5.  温馨提示

流行季节：赤羽病具有明显的季节性，主要发生在夏末秋初（蚊虫活跃期），此时是试剂盒使用的高峰期。

鉴别诊断：赤羽病的临床症状（如关节弯曲）与茨城病（由茨城病毒引起）非常相似，且两者均由库蠓传播，建议在条件允许的情况下，使用多重PCR试剂盒进行联合检测以区分。

样本选择：对于流产病例，胎儿脑组织和脾脏是病毒含量最高的部位，检出率最高。

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通用操作流程与注意事项：

1. 样本制备

使用核酸提取试剂盒纯化DNA/RNA，需设置阳性、阴性对照。

关键点：避免交叉污染，阳性对照单独存放。

2. 反应体系配置

常规PCR：引物、dNTPs、Taq酶、模板DNA。

qPCR：需额外加入探针或染料。

3. 扩增程序

常规PCR：

预变性→循环扩增→延伸

qPCR：

预变性→循环扩增（荧光采集）

4. 结果判读

常规PCR：电泳观察条带大小（如阳性对照需出现预期条带）。

qPCR：Ct值≤35为阳性，阴性对照无信号。