兔出血症病毒通用型(RHDV)核酸检测试剂盒（荧光PCR法） 新品

 产品介绍：

这是一种用于检测兔出血症病毒（Rabbit Hemorrhagic Disease Virus）的高灵敏度分子诊断试剂，广泛应用于养兔场疫病监控、实验动物质量控制及出入境检疫。

1. 核心用途与背景 ��

针对疾病：兔出血症（Rabbit Hemorrhagic Disease, RHD），又称“兔瘟”。这是一种由杯状病毒科病毒引起的急性、高度致死性传染病，主要感染3月龄以上的青年兔和成年兔，致死率极高（可达90%-100%）。

检测靶标：试剂盒通常针对RHDV基因组中的保守序列设计引物和探针。常见的靶标基因为VP60（衣壳蛋白）基因或RNA依赖性RNA聚合酶（RdRp）基因。

通用型含义：能同时检测RHDV的经典毒株（RHDV-GI.1）以及近年来出现的变异株（RHDV2，即GI.2），具有广谱性。

适用样本：适用于肝脏、脾脏、肾脏等组织匀浆、全血、棉拭子及环境样本。

2. 检测原理与技术 ��

技术方法：实时荧光定量RT-PCR法（TaqMan探针法）。

原理：由于RHDV是单股正链RNA病毒，试剂盒采用一步法RT-PCR。在反应体系中，逆转录酶将病毒RNA转录为cDNA，随后Taq酶进行扩增。特异性TaqMan探针（标记FAM荧光素）在扩增过程中被切断，释放荧光信号，仪器实时监测荧光值变化。

优势：相比传统的血凝试验（HA）和血凝抑制试验（HAI），PCR法不受抗体干扰，灵敏度更高，且能检测出潜伏期感染及变异株（部分变异株可能无法通过传统血清学方法有效检出）。

3. 主要性能参数 ��

性能指标  参数详情  备注

检测限  1×10³ 拷贝/mL  灵敏度高，可检出微量感染

特异性  100%  不与多杀性巴氏杆菌、大肠杆菌等其他兔病原体交叉反应

检测时间  约 60 - 90 分钟  含逆转录及扩增过程

包装规格  25T / 48T / 50T  T代表测试次数

储存条件  -20℃  避光保存，避免反复冻融

有效期  12个月  具体以产品说明书为准

4. 结果判读标准 ��

阳性（+）：

FAM荧光通道出现典型的S型扩增曲线。

Ct值 ≤ 35（部分厂家标准为38）。

结论：样本中检出兔出血症病毒核酸。

阴性（-）：

FAM通道无Ct值，或Ct值 > 38，且无指数增长期。

无效实验：

阳性对照未扩增（Ct值 > 35）。

阴性对照出现扩增曲线。

5. 温馨提示

生物安全：兔出血症病毒属于高致病性病原，操作病死兔组织时，务必做好个人防护（戴口罩、手套）及环境消毒，防止病毒扩散。

鉴别诊断：兔出血症与兔黏液瘤病在临床上容易混淆（都有出血症状），建议在条件允许的情况下，使用双重荧光PCR试剂盒同时检测这两种病毒，以提高诊断准确率。

疫苗干扰：目前的组织灭活疫苗通常不会导致荧光PCR检测出现阳性（因为疫苗中的病毒核酸已被破坏或量极少），若在免疫后检测出强阳性（Ct值<30），通常提示存在野毒感染。

PCR试剂盒的核心类型：

1. 常规PCR试剂盒

原理：通过引物扩增目标DNA片段，产物经琼脂糖电泳检测。

特点：操作简单、成本低，适用于定性检测（如牛疱疹病毒1型PCR试剂盒）。

典型应用：动物病原体筛查。

2. 荧光定量PCR（qPCR）试剂盒

探针法（TaqMan）：

利用特异性探针结合目标序列，荧光信号实时监测扩增过程。

优势：高特异性（如牛白血病病毒试剂盒）、宽线性范围（10²–10⁷拷贝/μL）。

染料法（SYBR Green）：

染料嵌入双链DNA发光，成本较低，但需优化引物特异性。

3. 恒温扩增试剂盒

技术：LAMP、RPA等，无需热循环仪，适合现场检测。

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