犬瘟热病毒(CDV)核酸检测试剂盒(荧光PCR法) 新品

产品介绍：

这是一种用于检测犬瘟热病毒（Canine Distemper Virus, CDV）的高灵敏度分子诊断试剂，广泛应用于宠物医院、兽医诊断实验室及毛皮动物养殖业（狐、貉、貂等）。

1. 核心用途与背景 ��

针对疾病：犬瘟热（Canine Distemper, CD），一种由副黏病毒科病毒引起的急性、高度接触性传染病。死亡率高达30%~80%，可感染犬科（犬、狼、狐）、鼬科（貂、雪貂）、浣熊科等多种食肉动物。

检测靶标：试剂盒通常针对CDV基因组中的保守序列设计引物和探针。常见的靶标基因包括：

N基因（核衣壳蛋白基因）：最常用，保守性强，适合广谱检测。

H基因（血凝素蛋白基因）或F基因（融合蛋白基因）：用于特定毒株分型或疫苗株鉴别。

适用样本：适用于全血（抗凝）、鼻咽拭子、眼分泌物、尿液、组织病料（肺、脾、淋巴结等）。

2. 检测原理与技术 ��

技术方法：实时荧光定量RT-PCR法（TaqMan探针法）。

原理：由于CDV是RNA病毒，试剂盒通常包含逆转录（RT）步骤。在反应体系中，首先将病毒RNA逆转录为cDNA，随后在Taq酶作用下进行PCR扩增。特异性TaqMan探针（标记FAM荧光素）在扩增过程中被切断，释放荧光信号，仪器实时监测荧光值变化。

一步法 vs 两步法：市面上主流为一步法试剂盒，即逆转录和PCR扩增在同一反应管中进行，操作简便，污染风险低。

3. 主要性能参数 ��

性能指标  参数详情  备注

检测限  10² - 10³ 拷贝/反应  灵敏度极高，可检出早期感染

特异性  100%  不与犬细小病毒、犬冠状病毒等其他犬类病原体交叉反应

检测时间  约 60 - 90 分钟  含逆转录及扩增过程

包装规格  25T / 48T / 50T  T代表测试次数

储存条件  -20℃  避光保存，避免反复冻融

有效期  12个月  具体以产品说明书为准

5. 结果判读标准 ��

阳性（+）：

FAM荧光通道出现典型的S型扩增曲线。

Ct值 ≤ 35（部分厂家标准为38）。

结论：样本中检出犬瘟热病毒核酸。

阴性（-）：

FAM通道无Ct值，或Ct值 > 38，且无指数增长期。

无效实验：

阳性对照未扩增（Ct值 > 35）。

阴性对照出现扩增曲线。

温馨提示

鉴别诊断：犬瘟热临床症状（如双相热、呼吸道症状、神经症状）复杂，易与犬细小病毒病、传染性肝炎等混淆，建议结合临床症状和其他病原检测综合判断。

疫苗干扰：弱毒疫苗接种后可能会在短时间内导致PCR检测呈阳性（通常Ct值较大），需结合免疫史判断。若需区分野毒感染与疫苗免疫，可选用针对特定基因（如H基因）的分型试剂盒。

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通用操作流程与注意事项：

1. 样本制备

使用核酸提取试剂盒纯化DNA/RNA，需设置阳性、阴性对照。

关键点：避免交叉污染，阳性对照单独存放。

2. 反应体系配置

常规PCR：引物、dNTPs、Taq酶、模板DNA。

qPCR：需额外加入探针或染料。

3. 扩增程序

常规PCR：

预变性→循环扩增→延伸

qPCR：

预变性→循环扩增（荧光采集）

4. 结果判读

常规PCR：电泳观察条带大小（如阳性对照需出现预期条带）。

qPCR：Ct值≤35为阳性，阴性对照无信号。