马媾疫（Dourine）核酸检测试剂盒（荧光PCR法） 新品

产品介绍：

这是一种用于检测马媾疫锥虫（Trypanosoma equiperdum）的高灵敏度分子诊断试剂，主要用于马属动物的进出口检疫、疫病净化及临床辅助诊断。

1. 核心用途与背景 ��

针对疾病：马媾疫（Dourine），又称杜氏病。这是一种由马媾疫锥虫引起的马属动物（马、驴、斑马）特有的慢性原虫病，主要通过交配或人工授精器械直接接触传播。

检测靶标：试剂盒通常针对马媾疫锥虫基因组中的保守序列（如18S rRNA基因、ITS区域或特异性表面糖蛋白基因）设计特异性引物和TaqMan探针。

适用样本：适用于生殖道拭子（阴茎、包皮、阴道黏膜）、全血、组织病料及精液。

2. 检测原理与技术 ��

技术方法：实时荧光定量PCR法（TaqMan探针法）。

原理：利用特异性探针（通常标记FAM荧光素）与目标DNA序列结合。在PCR扩增过程中，Taq酶的5'→3'外切酶活性会切断探针，释放荧光信号。仪器实时监测荧光信号的累积，从而实现对马媾疫锥虫核酸的定性检测。

优势：相比传统的补体结合试验（CFT）或凝集反应，PCR法具有早期诊断优势（可在潜伏期或症状出现前检出），且特异性更强。

3. 主要性能参数 ��

性能指标  参数详情  备注

检测限  1×10³ 拷贝/mL  灵敏度高，可检出微量感染

特异性  100%  不与伊氏锥虫、巴贝斯虫等其他马属寄生虫交叉反应

检测时间  约 1.5 - 2 小时  含核酸提取及扩增过程

包装规格  50T/盒  也有25T规格

储存条件  -20℃  避光保存，避免反复冻融

有效期  12个月  具体以产品说明书为准

4. 结果判读标准 ��

阳性（+）：

FAM荧光通道出现典型的S型扩增曲线。

Ct值 ≤ 35（部分厂家标准为38）。

结论：样本中检出马媾疫锥虫核酸。

阴性（-）：

FAM通道无Ct值，或Ct值 > 38，且无指数增长期。

无效实验：

阳性对照未扩增（Ct值 > 35）。

阴性对照出现扩增曲线。

温馨提示

检疫意义：马媾疫是OIE（世界动物卫生组织）要求申报的法定传染病，也是我国进出境动物检疫的一类传染病。荧光PCR法是目前国际推荐的高灵敏度检测手段。

采样关键：由于该病原体主要寄生于生殖道黏膜，因此生殖道拭子（特别是包皮/阴道黏膜刮取物）的检出率通常远高于血液样本。

生物安全：虽然马媾疫主要感染马属动物，但在处理病料时仍需遵守生物安全二级（BSL-2）防护规范，避免直接接触病原。

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通用操作流程与注意事项：

1. 样本制备

使用核酸提取试剂盒纯化DNA/RNA，需设置阳性、阴性对照。

关键点：避免交叉污染，阳性对照单独存放。

2. 反应体系配置

常规PCR：引物、dNTPs、Taq酶、模板DNA。

qPCR：需额外加入探针或染料。

3. 扩增程序

常规PCR：

预变性→循环扩增→延伸

qPCR：

预变性→循环扩增（荧光采集）

4. 结果判读

常规PCR：电泳观察条带大小（如阳性对照需出现预期条带）。

qPCR：Ct值≤35为阳性，阴性对照无信号。