犬巴贝斯虫(Bab)核酸检测试剂盒(荧光PCR法) 新品

 产品介绍：

巴贝斯虫病是一种由蜱虫传播的血液原虫病，俗称“焦虫病”，在犬类中发病率较高，临床表现为高热、贫血、黄疸和血红蛋白尿。荧光PCR法因其高灵敏度和特异性，已成为该病早期诊断和分型的重要工具。

以下是基于现有科研试剂信息整理的该试剂盒详细技术解析：

1. 核心检测原理

该试剂盒通常采用TaqMan荧光探针法实时荧光定量PCR（qPCR）技术。

靶点基因： 针对巴贝斯虫基因组中的保守序列设计引物和探针，常用的靶基因包括18S rRNA（核糖体小亚基RNA）或Cyt b（细胞色素b）基因。

检测机制： 提取全血样本中的DNA进行扩增。如果样本中含有巴贝斯虫DNA，探针会被特异性切割并释放荧光信号（通常为FAM通道），仪器通过监测荧光信号的增加来判断结果。

2. 试剂盒的关键性能指标

高特异性： 能特异性检测犬巴贝斯虫（如Babesia canis、Babesia gibsoni等），不与其它犬类病原体（如埃立克体、利什曼原虫）发生交叉反应。

高灵敏度： 检测下限极高，部分产品可检测到 10-100 拷贝/μL 的DNA浓度，甚至能检测出早期或低虫血症的隐性感染。

快速检测： 全程（含核酸提取）约 2-3小时。

3. 试剂盒组成（典型配置）

一个标准的50T（次）试剂盒通常包含以下组分：

组分名称  作用  保存条件

PCR反应液  含dNTPs、Mg²⁺、缓冲液、引物/探针  -20℃ 保存

酶混合液  含Hot Start Taq酶  -20℃ 保存

阳性对照  含巴贝斯虫靶基因的质粒或灭活虫体  -20℃ 保存

阴性对照  无核酸酶水  2-8℃ 保存

4. 适用样本类型

抗凝全血： 最主要的检测样本，通常使用EDTA-2Na抗凝管采集静脉血。

组织样本： 如脾脏、淋巴结（主要用于病死动物的检测）。

5. 结果判读标准（参考）

阳性（+）： FAM通道出现典型的S型扩增曲线，且 Ct值 ≤ 35-38（具体阈值依厂家说明书而定），表明样本中存在犬巴贝斯虫核酸。

阴性（-）： 无Ct值，或Ct值 > 38/。

可疑（±）： Ct值在临界值附近（如35-38），建议重新检测。

6. 临床应用意义

早期诊断： 在显微镜下尚未观察到虫体时，PCR即可检测出病原，实现早发现早治疗。

区分亚型： 通过设计针对不同种（如犬巴贝斯虫 B. canis 与吉氏巴贝斯虫 B. gibsoni）的特异性引物，可帮助兽医选择更精准的治疗方案。

疗效监测： 治疗后可通过Ct值的变化评估体内虫体载量的下降情况。

PCR试剂盒的核心类型：

1. 常规PCR试剂盒

原理：通过引物扩增目标DNA片段，产物经琼脂糖电泳检测。

特点：操作简单、成本低，适用于定性检测（如牛疱疹病毒1型PCR试剂盒）。

典型应用：动物病原体筛查。

2. 荧光定量PCR（qPCR）试剂盒

探针法（TaqMan）：

利用特异性探针结合目标序列，荧光信号实时监测扩增过程。

优势：高特异性（如牛白血病病毒试剂盒）、宽线性范围（10²–10⁷拷贝/μL）。

染料法（SYBR Green）：

染料嵌入双链DNA发光，成本较低，但需优化引物特异性。

3. 恒温扩增试剂盒

技术：LAMP、RPA等，无需热循环仪，适合现场检测。

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