牛传染性鼻气管炎病毒(IBRV)核酸检测试剂盒(荧光PCR法) 新品

 产品介绍：

核心技术参数与性能

检测原理：

基于实时荧光定量PCR（qPCR）技术，通常采用TaqMan探针法或染料法（SYBR Green）。

针对牛传染性鼻气管炎病毒（IBRV，即牛疱疹病毒1型/BHV-1）的保守基因区域（如gB基因或UL50基因）设计特异性引物和探针。

检测范围与灵敏度：

灵敏度： 大多数试剂盒的最低检测限可达 1×10³ copies/mL 左右。部分采用纳米增强技术（Nano-qPCR）的试剂盒灵敏度可提升10倍，最低检出限可达 3.5×10⁰ copies/μL。

线性范围： 通常为5个数量级，能够准确定量病毒载量。

特异性：

专一性识别IBRV，不与其他牛呼吸道病原体（如牛病毒性腹泻病毒BVDV、口蹄疫病毒FMDV、牛副流感病毒PIV3等）发生交叉反应。

3. 标准操作流程 (SOP) 关键点

样本类型：

适用标本： 病牛的鼻腔拭子、眼拭子、全血、组织研磨液（如肺脏、气管）或乳汁。

核酸提取：

需自备病毒DNA提取试剂盒。IBRV为DNA病毒，提取后可直接作为模板进行PCR扩增（无需反转录步骤）。

试剂配制与加样：

对照设置： 必须设置阴性对照（无菌水或阴性质控品）和阳性对照（试剂盒提供，通常为质粒或灭活病毒）。

反应体系： 通常为20μL体系（如5μL模板 + 10μL 2×Mix + 0.4μL引物/探针 + 补水至20μL）。

荧光PCR扩增：

荧光通道： 选择 FAM 通道（或根据试剂盒说明书指定的染料）。

程序设置（参考）：

预变性：95℃ 10min

循环反应（40-45个循环）：95℃ 15sec -> 60℃ 30-40sec（收集荧光）。

结果判定：

阳性： Ct值 ≤ 35-40，且扩增曲线呈明显的“S”型指数增长。

阴性： 无Ct值，或Ct值 > 40，且无典型扩增曲线。

可疑： Ct值在40-45之间，建议重复检测，若复测仍有指数增长，判为阳性。

4. 采购与使用注意事项

储存条件： 大多数试剂盒需在 -20℃ 条件下保存，避免反复冻融（部分探针法试剂盒需避光保存）。

有效期： 一般为 12个月（1年）。

仅限科研/检测： 绝大多数此类产品标注为“仅用于科研实验”或“兽医体外诊断”，严禁用于临床医疗或人用。

生物安全： 操作病料样本时需在生物安全二级（BSL-2）实验室进行，做好个人防护。

PCR试剂盒的核心类型：

1. 常规PCR试剂盒

原理：通过引物扩增目标DNA片段，产物经琼脂糖电泳检测。

特点：操作简单、成本低，适用于定性检测（如牛疱疹病毒1型PCR试剂盒）。

典型应用：动物病原体筛查。

2. 荧光定量PCR（qPCR）试剂盒

探针法（TaqMan）：

利用特异性探针结合目标序列，荧光信号实时监测扩增过程。

优势：高特异性（如牛白血病病毒试剂盒）、宽线性范围（10²–10⁷拷贝/μL）。

染料法（SYBR Green）：

染料嵌入双链DNA发光，成本较低，但需优化引物特异性。

3. 恒温扩增试剂盒

技术：LAMP、RPA等，无需热循环仪，适合现场检测。

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