布氏杆菌(BS)核酸检测试剂盒(荧光PCR法) 新品

产品介绍：

这是一种用于检测布鲁氏菌（Brucella spp.）的高灵敏度分子诊断试剂，广泛应用于疾控中心、医院检验科及畜牧兽医领域。

1. 核心用途与背景 ��

针对疾病：布鲁氏菌病（Brucellosis），俗称“布病”，是一种人畜共患的传染性疾病。

检测对象：试剂盒通常针对布鲁氏菌基因组中的保守序列（如BCSP31基因、IS711插入序列或16S rRNA基因）进行扩增。

适用样本：适用于全血（抗凝血）、血清、组织液、牛奶、流产胎儿组织等临床样本。

应用场景：用于布氏杆菌感染的早期辅助诊断、流行病学调查及动物检疫。

2. 检测原理与技术 ��

技术方法：实时荧光PCR法（TaqMan探针法）。

原理：设计一对布鲁氏菌特异性引物和一条特异性探针。在PCR扩增过程中，探针被Taq酶水解，释放荧光基团，通过检测荧光信号的累积来判断样本中是否存在布鲁氏菌核酸。

内标质控：部分高端试剂盒包含内源性内标（IC），用于监测试剂盒的有效性及样本中是否存在PCR抑制物。

3. 主要性能参数 ��

性能指标  参数详情  备注

检测限  10² - 10³ 拷贝/反应  灵敏度极高，可检测出低浓度感染

特异性  100%  不与结核分枝杆菌、大肠杆菌等非目标菌种发生交叉反应

检测时间  约 1.5 - 2 小时  含核酸提取及扩增过程

包装规格  25T / 50T / 48T  T代表测试次数

储存条件  -20℃  避光保存，反复冻融不超过5次

有效期  12个月  具体以产品说明书为准

4. 推荐反应程序 (PCR仪设置) ⚙️

以下是通用的两步法扩增程序参考（具体请以所购试剂盒说明书为准）：

UNG处理（防污染）：37℃，2分钟（min）。

预变性：95℃，3-5分钟（min）。

PCR扩增（40-45个循环）：

变性：95℃，5-15秒（s）。

退火/延伸：55℃ - 58℃，30-40秒（s）（在此阶段采集荧光信号）。

5. 结果判读标准 ��

阳性（+）：FAM荧光通道出现典型的S型扩增曲线，且Ct值 ≤ 35（部分厂家标准为38）。

阴性（-）：FAM通道无Ct值，或Ct值 > 38，且无指数增长期。

无效实验：

阳性对照无扩增（Ct值 > 35 或无曲线）。

阴性对照出现扩增曲线。

注：若对照不符合要求，本次实验作废。

温馨提示

生物安全：布鲁氏菌属于生物安全三级病原（BSL-3），在处理阳性样本时，务必在生物安全柜中操作，做好个人防护（戴手套、口罩）。

假阳性风险：对于已经接种过布鲁氏菌疫苗或使用抗生素治疗后的样本，由于细菌DNA可能仍存在，PCR检测可能会呈阳性，需结合临床症状和血清学检测（如SAT、ELISA）综合判断。

核酸提取：建议使用试剂盒配套的核酸提取试剂，或使用磁珠法/离心柱法提取试剂，以保证提取效率。

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通用操作流程与注意事项：

1. 样本制备

使用核酸提取试剂盒纯化DNA/RNA，需设置阳性、阴性对照。

关键点：避免交叉污染，阳性对照单独存放。

2. 反应体系配置

常规PCR：引物、dNTPs、Taq酶、模板DNA。

qPCR：需额外加入探针或染料。

3. 扩增程序

常规PCR：

预变性→循环扩增→延伸

qPCR：

预变性→循环扩增（荧光采集）

4. 结果判读

常规PCR：电泳观察条带大小（如阳性对照需出现预期条带）。

qPCR：Ct值≤35为阳性，阴性对照无信号。