霍山石斛探针法荧光定量PCR试剂盒 新品

霍山石斛探针法荧光定量PCR试剂盒

商品属性

产品概述

本试剂盒基于TaqMan探针法荧光定量PCR技术，专用于霍山石斛（Dendrobium huoshanense）的特异性检测。通过针对霍山石斛保守基因区域设计的引物和探针，可实现高灵敏、高特异的核酸定量或定性分析，适用于药材真伪鉴别、科研检测等场景。

产品特点

即开即用：用户仅需提供待测DNA模板。

高特异性：引物及探针经优化设计，可有效区分霍山石斛与其他近缘物种（如铁皮石斛、齿瓣石斛）。

内控设计：含阳性对照（无传染性DNA片段），避免假阴性干扰。

闭管操作：一管式反应体系，降低交叉污染风险。

双重用途：支持定性和定量检测，定量线性范围达5个数量级（10^2~10^7拷贝/μL）。

适配性广：兼容主流荧光定量PCR仪（ABI、Bio-Rad、LightCycler等）。

包装规格

| 成分 | 规格 |

| 2×Probe qPCR预混液 | 500 μL（-20℃避光保存） |

| 荧光PCR专用稀释液 | 1 mL |

| 霍山石斛qPCR引物混合液 | 100 μL |

| 霍山石斛qPCR探针 | 50 μL（棕色管避光保存） |

| 阳性对照（1×10^8拷贝/μL） | 50 μL |

| 使用说明书 | 1份 |

保存与运输

储存条件：-20℃避光保存，有效期12个月，避免反复冻融（≤7次）。

运输方式：低温冰袋运输，确保试剂稳定性。

实验步骤

1. 标准曲线制备（以10倍梯度稀释为例）

标记离心管（7~2号），依次加入45 μL稀释液，从阳性对照（10^8拷贝/μL）开始梯度稀释至10^2拷贝/μL，每步更换枪头并充分震荡。

2. 样本DNA提取

建议使用商品化DNA提取试剂盒，设置阴性对照（水）和阳性对照（稀释后的阳性DNA）。

3. PCR反应体系（20 μL/管）

| 成分 | 样品管/阳性对照 | 阴性对照（水） |

| 2×Probe qPCR预混液 | 10 μL | 10 μL |

| qPCR探针 | 1 μL | 1 μL |

| 引物混合液 | 2 μL | 2 μL |

| 待测DNA/标准品/水 | 7 μL | 7 μL |

4. PCR程序

预变性：95℃ 5分钟；

40循环：95℃ 15秒 → 60℃ 1分钟（采集FAM通道信号）。

5. 数据分析

定量检测：以标准曲线log值为横轴、Ct值为纵轴，计算样本浓度。

定性检测：阴性对照Ct≥40；阳性对照Ct≤30；样本Ct≤35判为阳性，≥40为阴性，35~40需复测。

注意事项

分区操作：样本处理、试剂配制、PCR扩增需在不同区域进行。

防污染措施：使用带滤芯枪头，避免气溶胶污染。

试剂解冻：使用前充分混匀并短暂离心，避免强光直射探针。

质量控制：每次实验需包含阴/阳性对照。

适用范围：科研用途，不适用于临床诊断。

公司正在出售的产品