凝结芽孢杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒 新品

凝结芽孢杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒

商品属性

产品概述

本试剂盒基于探针法荧光定量PCR技术开发，专用于检测凝结芽孢杆菌（Bacillus coagulans）或其特定亚型（如BC01）的核酸，适用于科研领域的定性或定量分析。试剂盒具有高灵敏度和特异性，可有效避免与其他微生物DNA的交叉反应，并提供标准曲线构建所需的阳性对照。

产品特点

即开即用：用户仅需提供待测DNA模板。

高灵敏度与特异性：引物及探针针对目标菌保守区域设计，检测限低至10拷贝/μL。

双重检测功能：支持定性和定量分析，定量线性范围达5个数量级（10^1–10^6 拷贝/μL）。

稳定性：含无传染性DNA片段作为阳性对照，避免活体样本污染风险。

兼容性：与主流DNA提取试剂盒兼容。

包装规格

试剂一：qPCR缓冲液，500 μL

试剂二：qPCR酶混合液，50 μL

试剂三：荧光PCR模板稀释液，1 mL

试剂四：PCR引物-探针干粉，50次反应

试剂五：阳性对照（10^7 拷贝/μL），50 μL

反应次数：50次（20 μL体系/次）

操作步骤

标准曲线制备

标记6管，分别加入45 μL稀释液。

梯度稀释阳性对照（10^7 拷贝/μL），依次获得10^6–10^1 拷贝/μL的标准品，冰上保存。

样本DNA制备

建议设置阴性对照（水）和阳性对照（稀释阳性模板）。

使用兼容的DNA提取方法纯化样本。

qPCR反应体系（20 μL）

程序设置：

逆转录（若需）：50℃ 10 min

预变性：95℃ 10 min

扩增（40循环）：95℃ 15 sec → 60℃ 60 sec（采集FAM信号）

数据分析

定量检测：通过标准曲线计算样本拷贝数。

定性检测：Ct≤39为阳性，Ct≥40为阴性；临界值需复测。

注意事项

分区操作：样本处理、试剂配制、扩增需在不同区域进行，避免污染。

质量控制：每次实验需包含阴/阳性对照。

保存条件：

短期：-20℃；长期：-70℃（≤6个月）。

运输需使用2–8℃冰袋，禁止反复冻融。

安全规范：实验废弃物需按生物危害物处理，工作台用10%次氯酸或75%乙醇消毒。

局限性

检测结果受样本质量、提取效率及运输条件影响。

基因变异可能导致假阴性；交叉污染可能导致假阳性。

仅限科研使用，不可用于临床诊断。

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