裸盖鱼源性成分探针法荧光定量PCR试剂盒

裸盖鱼源性成分探针法荧光定量PCR试剂盒

商品属性

产品概述

本试剂盒基于探针法实时荧光定量PCR（qPCR）技术，专用于检测食品、生物样本或其他材料中的裸盖鱼（Anoplopoma fimbria）源性成分。通过针对裸盖鱼基因保守区域设计的特异性引物和探针，可实现高灵敏度、高特异性的定性与定量检测，适用于科研领域对食材真伪鉴定及过敏原筛查的需求。

产品特点

高特异性：引物与探针针对裸盖鱼独有基因序列设计，无交叉反应。

灵敏度优异：检测下限达0.01%（混合样品）或0.1 ng/μL（核酸浓度）。

快速高效：闭管操作，全程约2小时完成，减少污染风险。

双重功能：支持定性与定量分析，定量线性范围覆盖5个数量级。

即开即用：预混MasterMix，仅需提供样品DNA模板。

质控完善：含阳性对照（无传染性DNA片段），有效区分假阴性。

试剂盒组成

核心组分：

2× Probe qPCR MasterMix

裸盖鱼特异性引物-探针干粉

荧光PCR专用模板稀释液

阳性对照（1×10^7拷贝/μL）

超纯水

辅助材料：详细使用手册。

注：不同批次组分不可混用，需避免反复冻融（建议分装保存）。

技术参数

| 项目 | 参数详情 |

| 规格 | 50次/盒（20μL反应体系） |

| 检测方法 | TaqMan探针法实时荧光PCR |

| 适用仪器 | ABI、Bio-Rad、LightCycler等主流荧光定量PCR仪 |

| 保存条件 | -20℃避光保存，有效期12-24个月 |

| 自备耗材 | 无核酸酶离心管、滤芯吸头等 |

操作流程

1. 标准曲线制备（定量分析）

将阳性对照按10倍梯度稀释（10^1–10^6拷贝/μL），独立操作避免污染。

2. 样品DNA提取

推荐使用商品化核酸提取试剂盒，提取后DNA应避免降解（短期-20℃保存，长期-70℃）。

3. PCR反应体系配制

每20μL体系含：10μL MasterMix、3μL引物-探针混合液、7μL模板DNA。

4. 扩增程序

预变性：95℃ 5分钟 → 循环阶段（45次）：95℃ 15秒 → 60℃ 60秒（采集FAM通道信号）。

4. 数据分析

定量：以标准曲线计算样品拷贝数。

定性：Ct值＜40为阳性，≥40或无扩增为阴性。

注意事项

实验分区操作（试剂配制、样本处理、扩增区分离），使用滤芯吸头。

阳性对照需最后添加，防止气溶胶污染。

若Ct值处于临界范围（30-35），建议重复检测。

仅限科研用途，不可用于临床诊断。

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